吴茱萸萃取物与常规药物对牙周炎致病菌敏感性的研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:george890120
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目的:利用抑菌圈实验评估加入中草药萃取物吴茱萸来降低抗生素使用剂量后对牙周炎牙周菌的生长的影响,为未来在牙周疾病治疗中减少抗生素滥用的同时多一种治疗的选择。  方法:实验分两部分进行,第一部分为制取安全剂量的茱萸萃取物。  先将实验组中草药吴茱萸粉末秤取10g溶于10毫升水并加热至摄氏100度萃取三十分钟,配置成100mg/毫升的吴茱萸萃取物,再利用细胞毒性试验计算出半致死浓度并推算出不影响细胞存活率(CC50)的安全剂量(2.5mg/ml至10mg/ml)后,将求得的吴茱萸萃取物浓度再分成5mg/ml和10mg/ml两组,分别与2mg/ml的美诺四环素(Minocycline)混合后作为实验组。第二部分主要以纸锭扩散法抑菌圈实验来验证实验组是否对牙周菌的生长具有抑制作用。本次牙周菌是用己证实造成牙周炎的主要致病菌Porphyromonas gingivalis(P.g)牙龈红棕色单胞菌和Prevotella intermedia(P.i)中间普雷沃氏菌来当作实验菌株,两者都是以血液培养基来培养,皆属厌氧菌。先将直径4mm滤纸锭高温高压灭菌后备用。再将分离培养完的革兰氏阴性厌氧菌P.g及P.i分别用接种环均匀涂布于两个血液培养基上。每一培养基平均、等距放入四片滤纸,每片滤纸分别加入5mg/ml和10mg/ml吴茱萸混合物形成两个萃取物实验组以及10mg/ml美诺四环素和蒸馏水制成两个对照组,并置于厌氧培养箱中,温度为37℃,气体比例为85%N,2.5%H2,10%CO2的环境下培养2至4日后观察结果,再以量尺测量出抑菌圈直径。  结果:在纸锭扩散法P.g实验组培养皿中5mg/m和10mg/ml吴茱萸与美诺四环素混合物的抑菌圈平均直径分别为4.2mm±0.3mm及5.2mm±0.3mm,10mg/ml美诺四环素抑菌圈的平均直径为6.2mm±0.2mm。而P.i实验组培养皿中5mg/ml和10mg/ml吴茱萸与美诺四环素混合物的抑菌圈平均直径分别为8mm±0.6mm及10mm±0.3mm,10mg/ml美诺四环素抑菌圈的平均直径为12mm±0.5mm,蒸馏水组在P.g和P.i中均未显示有抑菌圈。在美诺四环素与吴茱萸萃取物各别纸锭扩散法P.g实验组中美诺四环素2mg/ml抑菌圈平均直径为3.2mm±0.25m,吴茱萸萃取物5mg/ml、10mg/ml各别抑菌圈为3.8mm±0.2mm及4.8mm±0.2mm。而P.i实验组中美诺四环素2mg/ml与吴茱萸萃取物5mg/ml、10mg/ml分别抑菌圈为5.3mm±0.3mm、6.2mm±0.2mm、8mm±0.2mm,由结果可知无论P.i和P.g在吴茱萸与美诺四环素混合物或是各别实验中可发现都有抑制牙周菌的生长。  结论:吴茱萸萃取物与美诺四环素混合物可以有效抑制牙周菌中的P.g及P.i的生长。当美诺四环素抗生素浓度由10mg/ml降至2 mg/ml时混合物仍能有效抑制牙周菌的生长。因此,天然中草药萃取物结合抗生素可以有效降低抗生素的使用剂量并抑制牙周菌生长。
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