二噁烷降解新菌株的分离鉴定、降解特性及菌剂制备研究

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本研究通过对上海某医药厂污水站好氧池的活性污泥进行长期驯化,分离到1株能以二噁烷为唯一碳源和能源进行持续生长的菌株DT8。经生理生化、脂肪酸鉴定和16SrRNA序列分析,确定该菌株为黄黄色杆菌DT8(Xanthobacter flavus DT8)。该菌株降解不需要经历诱导的过程即可稳定降解二噁烷,这一特性不但解决了环境微生物扩大培养的难题也保证了菌株应用于废水处理的工程应用中降解的稳定性。在此基础上,本研究通过优化培养基大大提高了细胞的比生长速率,进一步应用于发酵罐扩培中得到大量具有高降解活性的菌体细胞。将其制备成稳定的微生物菌剂,不但保持了良好的降解活性,而且可较长时间保存的菌剂成品。本研究对微生物降解二噁烷的环境因素进行了改良,得到较适宜二噁烷降解的温度和初始pH;该微生物对环境营养要求较低,受初始底物浓度高低的降解影响较小,表明此菌株在环境中具有较好的竞争力;对培养基成分的考察发现盐度对微生物降解活性的影响较大,而无机氮源对降解活性没有显著的影响;此外,有机氮源及第二碳源的加入可大大提高降解活性。进一步深入探讨微生物降解二噁烷的降解机理,由GC/MS分析分别检测到中间产物1,4-二噁烯、乙二醇和乙二酸的存在;初步探讨得出菌株降解二噁烷是在单加氧酶的作用发生催化氧化,该单加氧酶是一种目前尚未报道的二噁烷降解酶类。结合中间产物和酶的性质推导出一条较为完善的可能的降解途径。通过对多种底物的相互作用研究阐述菌株DT8对环醚类化合物的降解特点,研究表明该菌株降解酶对底物二噁烷和THF可能分别存在不同的结合位点,并且THF的存在促进微生物对二噁烷的降解,其自身的降解却受到一定程度的抑制。本研究为生物法净化含二噁烷废水及废气的工程应用奠定了基础。
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