皂甙糖基的酶水解作用研究

来源 :华南理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asdf303
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文以微生物所产的酶水解皂甙糖基,提高其活性为目标,采用甘草皂甙和人参皂甙Rg3等皂甙,主要研究了产皂甙糖苷酶的微生物选择、皂甙糖苷酶的分离提纯及酶性质,并探讨了酶反应机理,也初步探讨了大豆皂甙在大豆发酵过程中的变化。 在甘草皂甙的研究中,采用2N HCl -50%的甲醇混合溶液水解甘草皂甙制备甘草皂甙元,得率达92%;用D101树脂和HP-20树脂提取甘草皂甙时洗脱液的最佳乙醇浓度均为50%,它们对甘草皂甙的吸附容量分别为209.0mg/g和256.0mg/g:甘草中制得的甘草皂甙粗品经D101树脂和HP-20树脂吸附和洗脱,得甘草皂甙纯品,收率分别为60%和86%;从八株霉菌中选出具有较高酶活力的能水解甘草皂甙分子中一个葡萄糖醛酸基变成高甜度单葡萄糖醛酸基甘草皂甙(GAMG酶活力)的Aspergillus sp.48菌和具有较高酶活力的能水解甘草皂甙分子中二个葡萄糖醛酸基变成甘草皂甙元(GA酶活力)的Aspergillus sp.39菌,两株菌的产酶最佳培养时间均为48hr:两株菌所产的酶经硫酸铵沉淀、透析、DEAE-Cellulose DE52离子交换柱分离提纯后得到纯酶。两株菌产的甘草皂甙水解酶洗脱梯度不同,收率分别为3.1%和7.2%。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,测得sp.48菌的酶蛋白分子量为60,000,sp.39菌的酶蛋白分子量为42,000;两株菌产的经分离提纯后的酶,均无法水解p-Nitrophenyl-β-Glucuronide,对p-Phenolphthalein-β-Glueuronide的水解能力也很弱,但它们都能水解甘草皂甙,其中sp.39菌产的甘草皂甙水解酶可水解甘草皂甙生成皂甙元,但却不能生成高甜度GAMG,而sp.48菌产的甘草皂甙水解酶可水解甘草皂甙生成GAMG和少量皂甙元。目的产物高甜度单葡萄糖醛酸基甘草皂甙的制备中,发酵液中加入甘草皂甙进行水解,转化率可达10%左右,未反应的甘草皂甙可以回收再利用,用树脂法提取高甜度单葡萄糖醛酸基甘草皂甙。 在人参皂甙的研究中,从八株霉菌中选出具有较高酶活力的能水解人参皂甙Rg3变成高抗癌人参皂甙Rh2(Rg3酶活力)的Aspergillus sp.48g和sp.848g菌,两株菌的产酶最佳培养时间均为36hr;两株菌所产的酶经硫酸铵沉淀、透析、高效液相蛋白制备色谱分离提纯后得到纯酶。两株菌所产人参皂甙Rg3β-葡萄糖苷酶均在40%左右的钠盐浓度下被洗脱下来,收率分别为3.0%和3.6%。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,测得sp.48g菌的酶蛋白分子量为34,000,sp.848g
其他文献
批评性电视新闻报道是电视新闻报道的重要组成部分,也是电视新闻舆论监督的重要表现。开展这类报道必须在思想上高度重视,在实践中严格把关,坚持正确的原则和方法。谨慎选题,细致
2005年特别日子的到来,使刘琼感觉到了快乐和幸福,因为她敲开了玫琳凯这扇粉红色的大门,成为一名优秀的经销商.回忆过去三年的点点滴滴,刘琼一直在思考:什么对于自己是最重要
血液透析是治疗各种急慢性肾病的主要手段.随着技术的不断成熟.收治的范围也逐渐扩大,对护理质量也提出了更高的要求。护理质量管理是医院管理的重要组成部分.是护理管理工作的核
径向基函数神经网络(RBFN)以其诸多优点,如坚实的理论基础、参数部分线性及快速的学习算法等,而日益受到重视。本文的研究旨在将该神经网络与非线性控制相结合,更好地应用于工程
本文以数学建模思想为研究对象,简要阐述了数学模型以及建模思想的内涵,重点从数学模型的提炼、构建以及利用等三个方面对数学建模思想在小学数学教学中的应用进行了分析研究。
目的:评价使用双下肢辅助固定装置固定盆腔肿瘤患者时,提高摆位精度的可行性。方法:30例需要盆腔照射的患者分别使用常规热塑体膜固定组(常规组)和常规热塑体膜配合双下肢辅助固定
日前,巴西出口与投资促进局经理Carlos Pan接受《中国对外贸易》杂志记者专访时表示,巴西日益成为中国在拉丁美洲最重要的投资目的地之一。
2016年党中央决定在全体党员中开展"学党章党规、学系列讲话,做合格党员"学习教育(以下简称"两学一做"学习教育),来深入学习贯彻习近平总书记系列重要讲话精神,以便进一步解决党员
ue*M#’#dkB4##8#”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:(100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
电子交互白板作为新型的现代教育技术手段走进课堂,适应了新课程的教学需要,尤其是在师生互动、资源共享、调动学生积极性等方面有较高的优越性.本文从教学环境、教师教学、