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YS4108菌为本试验室采用多种活性追踪方法分离得到的一株海洋真菌,从其菌丝体中提取到的大分子量多糖YCP具有较高的免疫促进作用,可作为肿瘤治疗的辅助用药进行开发。本研究在寻找优化的YS4108菌发酵工艺以保证YCP稳定的药源供应的同时,努力弄清楚海洋真菌YS4108的生长特性,以及其产糖规律,这些工作可以为真菌生理学及菌丝体多糖方面的研究工作提供一些参考。
通过研究,采用一系列单因数和正交试验设计的方法,优化了一级摇瓶种龄、培养温度及初始pH等,得到了最佳的摇瓶培养条件为:28℃,初始pH 6.0,120 r/min,7d,1L摇瓶装液量400m。优化了培养基的碳源、氮源和无机盐,得到玉米粉结合蔗糖做碳源、硝酸钠结合酵母膏做氮源有利于YS4108菌生长和产糖,确定的最佳配方为:蔗糖2.5%,玉米粉1%,NaNO30.2%,酵母膏0.2%,KH2PO40.05%,MgSO4·7H2O 0.05%,KCl 0.05%,FeSO40.001%,人工海水100%。在此发酵条件下,YCPs的收获率为0.2274g/L,是优化前工艺的3.6倍。
用4吨大罐进行了中试发酵,确定了发酵工艺条件:4000 L大罐计料2500 L,加入消泡剂0.2%(V/N),初始pH6.0~6.2,温度27~29℃,通气量1:0.5,搅拌速率60 r/min,罐压0.05 Mpa。得到了在罐培养时的YS4108菌生长过程曲线、基质消耗曲线、pH变化曲线、YCP粗品及其各组分随时间变化的曲线,分析这些曲线,能得到YS4108菌生长和产糖的基本规律。得到YS4108菌干重收获率的最大值为16.28 g/L,约是摇瓶培养获得的最大值的2.1倍。试验结果也表明发酵培养基具有较强的pH缓冲能力。进一步将YS4108菌生长、产糖与菌球直观、微观形态结合起来,确定了最佳的发酵终止时间为80小时,比摇瓶培养条件缩短了88小时。另外,还验证了YS4108菌在这一工艺条件下的发酵稳 定性。