背景:血管外肺水增多是成人、儿童以及新生儿常见肺脏疾病的病理基础之一。血管外肺水是指肺内液体积聚在肺血管外,主要在肺泡间质和肺泡内,其在临床上表现为肺水肿。肺液累积可引起呼吸衰竭。目前,临床上血管外肺水可以通过多种手段进行评估,但各有缺点。随着肺脏超声技术的发展,肺脏超声被用来诊断肺水肿以及定量评价血管外肺水。同时,肺脏超声可以用来判断肺脏病理改变。基于肺脏超声的图像特点,结合临床观察,我们试图寻求适合新生儿定量血管外肺水评价的策略。另外,运用肺脏超声动态监测肺内血管外肺水增多超声图像随时间的转变,并探求其潜在机制。方法:本研究通过经气管插管向新西兰兔肺内注入不同剂量生理盐水建立动物模型,研究不同含量血管外肺水在肺脏超声上的表现,运用肺脏超声定量评价血管外肺水。通过我们预先设定的B线评分系统和不同血管外肺水含量模型来研究超声定量评分与血管外肺水之间的相关性,以及不同血管外肺水对氧合的影响。同时,结合临床观察,运用肺脏超声监测新西兰兔肺内注入不同剂量生理盐水后4小时期间超声图像的改变,通过组织病理分析研究其超声图像与病理改变的相关性。运用qRT-PCR、Western Blot以及免疫组化方法检测其对肺表面活性蛋白B和C,以及肺内水通道蛋白1和Na、K-ATPase蛋白表达的影响。结果:随着注入肺内生理盐水量的增加超声B线评分相应增加,呼吸窘迫加重。B线评分与肺脏湿/干(r2=0.946)和PaO2/FiO2(r2=0.916)具有显著的统计学相关性。此外,同一研究者和不同研究者之间的B线评分一致性良好。当注入肺内的生理盐水体积≤4ml/kg时,4小时后肺脏超声显示肺水大部分被吸收。当注入的生理盐水体积≥6ml/kg,部分肺水肿的区域表现为肺实变,qRT-PCR及Western blot结果显示肺表面活性蛋白B和肺表面活性蛋白C的mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.05)。同时,水通道蛋白1和Na、K-ATPase的mRNA及蛋白表达水平显著降低。免疫组化染色显示了同样的结果。结论:本研究显示,B线评分可作为评价血管外肺水增多的一个敏感、定量、无创、实时的指标。B线评分与肺重量测量结果有显著的相关性,另外,B线评分还可以预测肺氧合状态。在临床上可以指导液体管理和呼吸支持策略。随着血管外肺水的增加,4小时后肺超声图像从肺水肿变为肺实变,其潜在的机制与肺表面活性蛋白表达的显著下调有关。在临床上可以指导外源性肺表面活性物质的应用。同时,随着血管外肺水的增加,4小时后水通道蛋白1和Na、K-ATPase的蛋白表达显著下调,可能导致肺泡液的清除障碍,加重肺损伤。