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【目的】本实验旨在将组织因子途径抑制物-2真核表达载体FEGFP-PN1-TFPI-2（tissuefactor pathway inhibitor-2，TFPI-2）转入人急性单核细胞白血病细胞系（SHI-1），观察SHI-1细胞中TFPI-2基因的表达，及对SHI-1细胞的增殖和生长的影响。【方法】1.将前期已构建好的人FEGFP-N1-TFPI-2基因真核表达载体，利用JM109感受态细胞进行质粒扩增，并利用质粒提取技术获得纯化的人FEGFP-N1-TFPI-2基因真核表达质粒。2.将FEGFP-N1-TFPI-2基因真核表达载体及空载体FEGFP-N1利用脂质体2000介导的基因转染技术，转入人急性单核细胞白血病细胞株SHI-1中。将成功转染FEGFP-N1-TFPI-2基因真核表达载体的SHI-1细胞命名为SHI-1-TFPI-2组即实验组。而未转染的细胞及转染空载体FEGFP-N1的细胞作为对照组，分别命名为（SHI-1-P组和SHI-1-V组）。3.通过蛋白免疫印迹法（Western blot）检测3组细胞中TFPI-2蛋白的表达。4.通过细胞计数的方法比较连续7天实验组与对照组SHI-1细胞每天的增殖速度和平均增殖速度，并绘制生长曲线。5.通过MTT法检测3组细胞24、48、72小时细胞的相对生长率，观察细胞的生长情况。【结果】1.转化后因目的质粒含有抗生素抗性基因，因而能在含有抗生素的LB培养基上生存下来，并形成单个菌落，经质粒提取得到纯化的FEGFP-N1-TFPI-2基因真核表达载体。2.Western Blot结果示：SHI-1-TFPI-2组可见TFPI-2蛋白条带，而SHI-1-V组及SHI-1-P组未见相应蛋白条带的表达。3.观察连续7天的细胞计数，计算得SHI-1-TFPI-2组、SHI-1-V组、SHI-1-P组细胞7天的平均增殖速度分别为0.6306，0.8348，0.8760，说明SHI-1-TFPI-2组细胞平均增殖速度减慢，实验组与对照组间差异有统计学意义（P<0.05）。绘制的生长曲线可见SHI-1-TFPI-2组细胞生长曲线较SHI-1-P、SHI-1-V组平坦，说明实验组细胞增殖速度减慢。4.MTT法比较SHI-1-P，SHI-1-V，SHI-1-TFPI-2三组细胞的相对生长率（%），可见24小时三组细胞的相对生长率（%）分别为(97±16.1)，(91.8±10.0)，(92.5±9.8)；48小时三组细胞的相对生长率（%）分别为(97±14.6)，(96.9±9.3)，(87.3±10.2)；72小时三组细胞的相对生长率（%）分别为(97±11.5)，(94.4±10)，(60.7±12.9）。使用SPSS13.0的方差分析计算，24小时后TFPI-2-SHI-1组细胞较SHI-1-P组、SHI-1-V组的相对生长率比较(P>0.05),差异无统计学意义。48小时及72小时后TFPI-2-SHI-1组细胞较SHI-1-P组、SHI-1-V组p<0.05,差异有统计学意义。表明在这三个时间段实验组细胞的相对生长率下降，随着时间的推移差异更加明显，48小时及72小时后各组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。【结论】1.成功构建了FEGFP-N1-TFPI-2-SHI-1细胞株，且TFPI-2基因稳定表达；2.TFPI-2基因的表达可以使SHI-1细胞的增殖速度减慢，相对生长率降低呈时间依赖性。