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目的:作为临床上常用的化疗药物,紫杉醇对各种恶性肿瘤都具有显著疗效,然而其诱发的外周神经病理性疼痛至今仍未发现有效的治疗手段,且随用药剂量的增加疼痛症状愈发加重,严重影响化疗患者的生存质量。因此阐明其具体生理病理过程具有十分重要的临床价值。 本实验通过腹腔注射紫杉醇制备大鼠神经病理性疼痛模型,腹腔注射白藜芦醇(resveratrol,Res)评价其对紫杉醇诱发大鼠神经病理性疼痛的影响,并通过鞘内注射LY294002探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路在其中的作用。 方法:清洁级SD雄性大鼠50只(体重180~200 g),鞘内置管,采用随机数字表法分为5组(n=10):单纯紫杉醇组(P组)、Res预处理+紫杉醇组(R+P组)、LY294002(PI3K抑制剂)+Res预处理+紫杉醇组(LY+R+P组)、Res对照组(R组)和正常对照组(C组)。第1、3、5、7天相同时点腹腔注射紫杉醇2 mg/kg,第2、4、6、8、10、12、14天的相同时点鞘内注射LY294002 2.5μg/10μl或腹腔注射Res 40 mg/kg,其中LY294002是在给予Res 1 h前完成。五组大鼠分别于腹腔给予紫杉醇给药前1天(T0)、给药后第8天(T1)、给药后第14天(T2)测定50%机械缩足痛阈(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL),第15天快速取纹状体,透射电镜观察线粒体形态的变化;采用免疫组化法测定纹状体内表达p-Akt和t-Akt蛋白的阳性细胞数;采用Western blot法测定纹状体内p-Akt、t-Akt的表达水平。 结果: 1. 行为学结果:在T1,2时点,与C组比较,P组和LY+R+P组MWT和TWL降低(P<0.05),R组MWT和TWL无明显变化(P>0.05);与P组比较,R+P组MWT和TWL升高,LY+R+P组MWT和TWL降低(P<0.05);与R+P组比较,LY+R+P组MWT和TWL降低(P<0.05)。 2. 透射电镜结果:透射电镜下可见C组和R组纹状体神经元线粒体形态正常,与之比较P组线粒体出现肿胀、空泡化等改变,LY+R+P组线粒体形态改变加剧,而R+P组线粒体损伤减轻。 3. 免疫组化结果:与C组表达p-Akt的阳性细胞数比较,R组表达上调,P组/R+P组/LY+R+P组表达下调(P<0.05);与R组表达p-Akt的阳性细胞数比较,P组/R+P组/LY+R+P组表达下调(P<0.05);与P组表达p-Akt的阳性细胞数比较,R+P组表达上调,LY+R+P组表达下调(P<0.05)。五组大鼠纹状体中表达t-Akt的阳性细胞数无显著差异(P>0.05)。 4. Western-blot结果:与C组p-Akt蛋白表达量比较,R组表达上调(P<0.05),P组/R+P组/LY+R+P组表达下调(P<0.05);与R组p-Akt蛋白表达量比较,P组/R+P组/LY+R+P组的表达均下调(P<0.05);与P组p-Akt蛋白表达比较,R+P组的表达上调(P<0.05),而LY+R+P组的表达下调(P<0.05)。五组大鼠t-Akt蛋白表达无显著变化(P>0.05)。 结论:白藜芦醇通过激活PI3K/Akt信号通路,减轻纹状体内线粒体损伤,预防紫杉醇诱发大鼠神经病理性疼痛的形成。