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本文主要研究了以人参二醇类皂苷(PPD)为底物,采用生物转化法制备人参皂苷F2,再利用人参自有酶系水解F2制备Rh2组混合物的方法。为选取合适的底物进行酶反应制备人参皂苷F2,首先确定了高效液相色谱法检测人参皂苷的色谱条件。包括检测人参二醇类原料皂苷PPD、人参三醇类原料皂苷PPT;红参浸膏、红参液中所含的人参皂苷;Rg2、Rg3、Rhl、Rh2组人参皂苷的色谱条件。人参原料皂苷中Rd的极性最大,出峰时间最晚,为39.975min,因此选择检测时间短的方法,而红参浸膏及红参液中含有一些低糖基的人参稀有皂苷,因此需要增加乙腈的浓度并延长分离时间。然后对能够将PPD皂苷转化为F2的两种菌以及两种含不同诱导物的培养基进行了比较。最终选取较为廉价的豆粕作为诱导物,sp.48菌作为产酶菌。最适酶反应条件为:最适底物浓度为5%、最适温度为40℃、最适酶反应时间为12小时,PPD皂苷转化为F2的转化率为80%以上。PPD皂苷在酶反应过程中除生成F2外,还会产生C-K等副产物。200g PPD经酶转化,可得到反应产物125g,取其中的50g经大孔吸附树脂AB-8脱糖、离子交换树脂D296脱色后,再利用硅胶柱层析法对酶反应产物分离纯化,得到纯度为96.7%的人参皂苷F2 4.19g,因此,以PPD为原料,制备F2的得率为5.24%。以10gF2为原料,利用人参中自身酶系酶解制备Rh2组皂苷,可得Rh2组混合品5.9g,得率为59%,经HPLC检测其纯度可达93.98%。将得到的Rh2组的粗品利用硅胶柱层析法将其分离得到Rh3与Rk2的混合品0.38g纯度为94%,其中Rh3:Rk2=65.5:34.5;得到 Rh2 纯品 2.56g,纯度为 98%,其中 20(S)-Rh2:20(R)-Rh2=61.6:38.4。然后利用结晶方法对20(S)-Rh2和20(R)-Rh2进行拆分,得到纯度为98%以上的20(S)-Rh2 1.22g,得率为 12.20%。