细颈线虫(Nematodirus)是绵羊常见的胃肠道线虫,在长期采用驱虫药防治过程中,某些虫株会对药物产生一定耐药性,进而导致药效降低等一系列问题。所以,研究细颈线虫的耐药性,对于反刍兽家畜胃肠道线虫病的防治,具有非常重要的意义。目前,国内外有关细颈线虫耐伊维菌素药物的研究相对较少。因此,本论文对内蒙古当地绵羊细颈线虫耐伊维菌素虫株,在分离、鉴定、培养、耐药性检测及耐药相关P-gps基因表达水平等方面,展开了研究。(1)对内蒙古锡林郭勒草原和呼伦贝尔草原牧场绵羊细颈线虫的感染情况,进行了纵向流行病学调查。结果显示:在锡林郭勒蓝旗五一牧场,春季和秋季驱虫前细颈线虫平均感染率分别是58.5%和56.3%;在呼伦贝尔新巴尔虎右旗,平均感染率分别是41.7%和55.6%。统计分析发现:春秋两季驱虫前两地区细颈线虫感染率无显著差异。(2)通过系列分离方法,获得了一株细颈线虫野生株,并利用传统形态学和分子生物学相结合的分类技术,对已分离的细颈线虫进行虫种鉴定。结果表明:该虫种是奥丽春细颈线虫(Nematodirusoiratianus)。(3)设计正交试验,对该野生株幼虫发育条件进行优化,在不同pH、温度、渗透压和光照时间条件下培养幼虫;结果发现:其发育的最适条件是pH值为5.5,温度27℃,渗透压为0 mOsm/kg,培养期间全程光照。(4)利用幼虫移行抑制试验,检测了该奥丽春细颈线虫虫株对伊维菌素的耐药性,数据显示其EC50=19.98 μg/mL,证实该虫株对伊维菌素已产生耐药性。(5)采用相对荧光定量PCR技术,对高低二种浓度的伊维菌素(19.98 μg/mL或3.9 μg/mL)在作用不同时间(0h、3h、6h、12h、24h)节点的奥丽春细颈线虫三期幼虫的 P-gps 基因(P-gp-1、P-gp-2、P-gp-3、P-gp-9.1、P-gp-11、P-gp-12)表达水平进行分析。结果与对照组比较,不同时间节点,P-gp-1基因均不表达;但P-gp-2、P-gp-3、P-gp-9.1、P-gp-11于12h时表达量达峰值,与0h的数值相比,有显著差异性(P＜0.01)。而P-gp-12基因表达量,在低浓度药物作用时很低;在高浓度药物作用时,随时间的增加,其表达量显著上调(P＜0.01)。