小爪象甲寄生中国菟丝子相关分子机理的研究

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小爪象甲(Smicronyx)是一类寄生昆虫,寄主范围狭窄,主要寄生菟丝子(Cuscuta)。小爪象甲的寄生会导致中国菟丝子(Cuscuta Chinensis)的茎段部位产生膨大形成虫瘿,小爪象甲与菟丝子相互作用的分子机理目前尚不清楚。为了探究虫瘿的形成机制,本研究观察了小爪象甲寄生菟丝子的生活史,通过高效液相色谱技术,明确小爪象甲寄生前后菟丝子茎段激素的含量变化,然后利用转录组测序分析菟丝子虫瘿与菟丝子茎段与激素相关的差异转录本,最后通过qRT-PCR验证相关基因在菟丝子虫瘿和菟丝子茎段中的差异表达情况。本研究的主要研究结果如下:1.对小爪象甲寄生菟丝子的生活史进行观察,发现小爪象甲属于卵-幼虫-蛹寄生昆虫。2.利用高效液相色谱法对小爪象甲寄生于菟丝子茎段所形成的虫瘿及相邻菟丝子茎段的茉莉酸(Jasmonic acid,JA)、水杨酸(Salicylic acid,SA)、生长素(Auxin)和细胞分裂素(Cytokinin,CTK)的含量进行测定。结果发现,菟丝子虫瘿中茉莉酸、生长素和细胞分裂素的含量均高于相邻菟丝子茎段。而菟丝子虫瘿中没有检测到水杨酸。这些结果说明,小爪象甲的寄生会引起菟丝子茎段的激素含量变化。3.利用二代测序技术,对菟丝子虫瘿与菟丝子茎段进行转录组测序分析。通过组装共得到184,322个转录本,其中27,925个转录本差异表达,9,925个差异表达转录本具有功能注释。4.通过生物信息学分析,将差异转录本与Uniport、Gene Ontology等数据库比对,结果注释到48个茉莉酸相关转录本,53个水杨酸相关转录本,76个生长素相关转录本和36个细胞分裂素相关转录本。进而使用KEGG数据库注释分析激素相关转录本在基因组中的潜在功能。并利用qRT-PCR对部分差异基因的表达进行验证,发现均符合转录组的分析结果。这些结果表明茉莉酸、水杨酸、生长素和细胞分裂素可能参与了菟丝子虫瘿的形成。这些结果为进一步研究小爪象甲与菟丝子相互作用的分子机制奠定了基础。
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