长链非编码RNA UNC5B-AS1在肾细胞癌中的表达及其调控机制

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近年来,随着长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)相关研究的深入,其功能和作用,尤其是在调节细胞增殖和凋亡中的重要作用,越来越受到人们的重视。此前已有研究证明,长链非编码RNA UNC5B-AS1可对部分肿瘤细胞的增殖起到促进作用,然而在肾细胞癌(RCC)中,UNC5B-AS1调控癌细胞的分子机制尚不明确。本课题针对UNC5B-AS1在RCC中生物学功能及其作用进行研究。目的:肾细胞癌是世界上最常见的泌尿系恶性肿瘤之一。在现有的肾细胞癌亚型中,肾透明细胞癌RCC(cc RCC)所占的比重最高,约有70%以上的患者被诊断为cc RCC。在RCC中UNC5B作为抑癌基因存在,并已得到了广泛的研究。其天然反义转录本UNC5B-AS1属于长链非编码RNA,也可参与肿瘤细胞各种生物学过程的调控。随着相关研究的不断加深,UNC5B-AS1也成为肿瘤潜在的治疗靶点之一。为了明确长链非编码RNA UNC5B-AS1在RCC的表达及其作用的分子机制,为肾细胞癌患者的诊断和治疗提供更多更有效的选择,开展了以下研究。方法:本研究首先通过生物信息学分析的方法对长链非编码RNA UNC5B-AS1进行分析,主要分析了在肾透明细胞癌(KIRC)中UNC5B-AS1的表达、UNC5B-AS1与患者生存时间、与临床肿瘤分期和分级的关系。同时在肾细胞癌临床样本中进行验证。再通过PCR、Western bloting、RTCA、克隆形成、EDU、CCK8等实验检测在RCC细胞中UNC5B-AS1的生物学功能,同时通过体内实验进行验证,发现UNC5B-AS1在RCC中是以癌基因的形式存在的。其次,通过PCR、Western bloting、RTCA、克隆形成、EDU、CCK8等实验检测UNC5B-AS1对RCC细胞化疗耐药的影响。最后明确UNC5B-AS1与抑癌基因UNC5B和和TP53信号通路的作用关系。结果:1.UNC5B-AS1在肾细胞癌呈高表达,具有促进肾细胞癌细胞增殖和迁移的能力,同时还可抑制癌细胞凋亡。是一种与肾细胞癌临床显著相关的致癌lncRNA。2.UNC5B-AS1降低了肾细胞癌细胞对化疗药物的敏感性。3.UNC5B-AS1是一种P53应答lncRNA,可直接结合并抑制UNC5B。结论:本研究结果表明长链非编码RNA UNC5B-AS1在肾细胞癌中具有致癌作用,同时UNC5B-AS1可通过直接相互作用介导的UNC5B下调进而减弱CDDP应答下TP53依赖的凋亡。同时,也提示UNC5B-AS1可作为RCC的预后标志物和潜在的治疗靶点之一,并有助于开发新的治疗方法来恢复TP53的功能。
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