辣椒轻斑驳病毒快速检测技术研究

被引量 : 9次 | 上传用户:YouYiDian
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究提纯了辣椒轻斑驳病毒,并对其病毒粒子形态进行了电镜观察,采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了其分子量,制备了用于斑点免疫结合法(DIBA)和胶体金免疫试纸条(CGIS)法检测的高效价的特异性抗血清,进而为快速、准确检测病毒打下了良好的基础。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)、斑点免疫结合法、胶体金免疫试纸条法、RT-PCR和实时荧光RT-PCR等方法和技术,对PMMoV检测技术进行了研究,并比较了各种检测方法的灵敏度及特异性。取得以下结果:(1)在检测1粒阳性种子时,DAS-ELISA、CGIS检测稀释限点为1:51200,DIBA稀释限点为1:12800,RT-PCR检测稀释限点为1:100000,实时荧光RT-PCR在稀释1:1000000时仍可检测到;在检测叶片时,DAS-ELISA、CGIS、DIBA检测稀释限点均为1:3200。(2)应用DIBA对国内市场上购买的17份辣椒种子携带PMMoV的检测结果表明,不同品种的辣椒种子携带PMMoV的带毒率不同,17份品种只有5份品种种子带毒率为0%,有7份品种种子带毒率超过50%,其中有3份品种种子带毒率超过90%。(3)RT-PCR检测PMMoV在辣椒种子上的带毒部位结果表明,PMMoV主要分布在种皮、种子表面,胚乳次之,不侵染胚。(4)通过对辣椒种子带毒与传毒的关系研究,带毒与不带毒的种子直播后均未发现发病植株及检测到PMMoV,移栽后,来自阳性种子的1280株植株中只检测到3株发病,传毒率为0.23%;另外两个带毒种子的品种和一个不带毒的品种共1500株植株中未发现发病植株及检测到PMMoV。
其他文献
外来入侵植物空心莲子草(Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb.)已成为一种全球性的恶性杂草。化学除草剂的使用在空心莲子草的防除上,占用十分重要的地位。但从目前情
由小麦条锈菌(Puccinia striiformis f.sp. tritici)引起的小麦条锈病是小麦生产上的一个重要病害,其大流行年份常常引起小麦的减产甚至绝收。培育抗病品种是控制小麦条锈病的一种有效途径。其中,抗病相关基因的克隆和功能验证对于培育抗病品种具有重要意义。类甜蛋白(Thaumatin-like protein,TLP)是一种病程相关蛋白,属于PR-5。研究表明,类甜蛋白具有抗真
先后从广西荔浦县青山镇、八步区莲塘镇、平乐县源头镇和广西大学贮藏室,采集4710个病荸荠样本,分离、纯化、鉴定获得11种病原菌,分别是:棘孢木霉(Trichoderma asperellum)、尖孢镰
[预案]北师大版一年级下册“买文具”教学流程设计rn一、创设情境,激情引入rn师:小朋友,还记得我们的好朋友机灵狗吗?好久没有看见它,知道它在干嘛吗?原来,它开了一家漂亮的
[案例]rn在学生疑惑的目光中,我写下了“逛新书”三个大字,开始了我新学期的第一节语文课.
本文从饵剂筛选、环境条件、红火蚁的觅食行为以及饵剂如何在检疫中加以应用等4个方面对红火蚁进行了研究.从报道红火蚁喜食的多种食料中,选择鱼粉、火腿肠、甘蔗粉、蜂蜜、玉
[案例]小学三年级口语交际课rn一、看一看:周围环境变化rn师:同学们,开学了,一个假期没见,老师非常想念你们.走,老师带你们到校园中转一转,看一看,周围有没有什么新变化?
本论文研究了38科89种植物98个样品对褐飞虱(Nilaparvata lugens Stal)的产卵忌避作用、驱避作用和触杀作用,进一步测定了有效植物萃取分离物和硅胶柱层析分离物对褐飞虱的生物
期刊
作为水稻“三大病害”之一的纹枯病,严重发生时可造成水稻严重减产和稻米品质降低。水稻对纹枯病的抗性主要是由数量性状基因所控制,且抗性材料遗传力低,以至目前生产上还未