论文部分内容阅读
目的建立射血分数保留的心力衰竭(heart failure with preserved left ventricular ejection fraction HFpEF)大鼠模型;探讨膳食锌浓度的改变对HFpEF的影响。方法选用6周龄达尔盐敏感大鼠(Dahl salt-sensitive rat,简称DSS大鼠)建立不同膳食锌浓度干预的射血分数保留的心力衰竭(heart failure with preserved left ventricular ejection fraction HFpEF)大鼠模型。将DSS大鼠随机分为4个实验组以及1个对照组,分别为高盐极高锌组,高盐高锌组,高盐正常锌组,高盐低锌组以及正常盐正常锌组(对照组)。其中高盐组的氯化钠总含量均为8%,对照组的氯化钠总含量为0.3%。极高锌组中锌总含量为270mg/kg,高锌组中锌总含量为90mg/kg,正常锌组中的锌总含量为30mg/kg,低锌组中锌总含量为10mg/kg。各个组别饲养条件以及饲料中除锌离子、氯化钠外的其他组分均相同。各组动物每两周监测体重、无创血压、心率变化,并在7周龄及20周龄行心脏超声检查。饲养至20周龄,获取大鼠血液、心肌以及湿肺样本。采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定模型血液中的BNP含量。采用实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction,qPCR)测定心肌组织中BNP mRNA的表达,采用Western Blot法测定心肌组织中BNP蛋白表达。将湿肺标本烘干后再次称重,计算湿肺/干肺结果。通过以上数据验证建模是否成功,并通过统计学方法比较各组间建模数据的差异探讨不同膳食锌浓度对HFpEF的影响。结果上述动物饲养至20周龄,高盐饮食组大鼠部分出现体重减轻,食欲减退,毛发灰暗,活动度下降等症状。高盐饮食组的收缩压及舒张压水平较对照组均明显升高,差异有统计学意义(p<0.05),但不同锌浓度干预的组别之间血压水平无明显差异。各组心率水平无明显差异。高盐正常锌组体重较高盐高锌、高盐低锌及对照组减轻,差异有统计学意义(p<0.05)。高盐极高锌组体重较高盐低锌组及对照组减轻,差异有统计学意义(p<0.05)。高盐高锌组体重较高盐低锌组及对照组减轻,但差异无统计学意义。心脏超声数据表示在饲养至20周龄,高盐饮食组大鼠E/A比值降低,舒张末期室间隔厚度(IVSd)增厚、舒张末期左室内径(LVDd)减小、舒张末期左室后壁厚度(LVPWd)增厚、收缩末期左室后壁厚度(LVPWs)增厚、左心室质量(LVM)增大、左心室质量与体重比增大,差异有统计学意义(P<0.05)。高盐低锌组左心室质量与体重比较高盐极高锌组降低,差异有统计学意义(p<0.05)。其他超声数据不同锌浓度组间均无明显差异。各组间射血分数(EF)以及收缩末期左室内径(LVDs)均无明显差异。高盐组血清BNP均明显高于正常盐组,差异有统计学意义(p<0.05)。在高盐组的组间比较中,高锌组的大鼠的血清BNP水平显著低于正常锌组,差异有统计学意义(p<0.05)。极高锌、低锌组血清BNP水平亦低于正常锌组中,但差异无统计学意义(p>0.05)。在对心肌BNP mRNA及蛋白表达水平的测定中,高盐组均明显高于正常盐组,差异有统计学意义(p<0.05)。mRNA表达水平高盐正常锌组略低于其他高盐组,差异无统计学意义(p>0.05)。高盐组蛋白表达水平无组间差异。测定大鼠湿肺/干肺结果,高盐饮食组湿肺/干肺结果均显著高于对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。高盐正常锌组和高盐极高锌组湿肺/干肺比值明显高于高盐高锌组及高盐低锌组,差异有统计学意义(p<0.05)。结合以上数据,可以确定本实验中通过DSS大鼠建立HFpEF动物模型可行,但不同浓度的锌干预未见明显的延缓或逆转心肌肥厚的作用。结论1.DSS大鼠可以通过高盐饲养引起高血压从而发展为HFpEF。2.不同膳食锌浓度的干预并不能逆转或延缓HFpEF大鼠的心肌肥厚。3.通过饮食适量补充锌可以降低HFpEF的血清BNP水平。4.膳食锌缺乏可能诱导大鼠出现肥胖,但并无明确的加重HFpEF的证据。