人体尿液中黄蝶呤与异黄蝶呤的分析方法的研究及其应用

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:haiwei2009
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
癌症是威胁人类生命的重大疾病之一,寻找疾病早期诊断方法是提高其治愈率的有效手段之一。蝶呤类化合物(包括黄蝶呤、异黄蝶呤、蝶呤、新蝶呤、生物蝶呤、蝶呤-6-羧酸)属于蝶啶的衍生物,分布于整个生物界,在细胞代谢过程中起着重要的辅助作用,其含量水平的变化在临床诊断上具有重要的价值。在蝶呤类化合物中,以新蝶呤研究较为深入,并已应用于临床上包括癌症在内的多种疾病的诊断,而其它蝶呤类化合物相对研究较少。本论文应用色谱分析技术,研究建立了人体尿液中黄蝶呤、异黄蝶呤三种分析新方法,并选择其中一种方法应用于大量健康人及癌症病人尿样分析,通过T检验发现,和健康人相比,癌症病人尿液中黄蝶呤和异黄蝶呤水平存在显著性差异。同时采用三维荧光光谱技术获得了不同人群尿液的指纹图谱,结合主成分分析的投影判别法和聚类分析法对尿样三维荧光谱的特征参数进行了模式识别研究。本文主要研究结果如下:1.建立了高效液相色谱-荧光分析同时测定人体尿液中的黄蝶呤与异黄蝶呤的分析新方法。以磷酸盐缓冲溶液(PH=7.5)-甲醇(98:2,v:v)为流动相,流速为1.0 mL/min,荧光检测波长λex=345nm,λem=420 nm。黄蝶呤含量在0.0013μg/mL~0.945μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,线性回归方程为y=3.0×106x+28959,相关系数为0.9999,检测限为0.5ng/mL;异黄蝶呤含量在0.00017μg/mL~0.118μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,线性回归方程为y=1.0×108x-162133,相关系数为0.9996,检测限为0.05ng/mL。平均加标回收率分别在83.9%~106.0%之间,相对标准偏差小于7.9%。尿液前处理方法简单,易操作。该方法用于人体尿液中黄蝶呤与异黄蝶呤的分析,结果良好。2.建立了高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI-MS)同时测定人体尿液中黄蝶呤与异黄蝶呤的分析方法。尿样经离心、过膜后直接进样,采用电喷雾质谱定性及定量。结果表明,黄蝶呤与异黄蝶呤浓度分别在0.0204μg/mL~2.04μg/mL及0.0202μg/mL~2.02μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,线性回归方程分别为y=342622x-7848 (r2=0.9995)及y=309694x-3573(r2=0.9997),检测限分别为0.007μg/mL和0.006μg/mL。黄蝶呤与异黄蝶呤加标平均回收在88.0%~110.0%之间。该方法前处理方法简单,易操作,应用于实际尿样分析,结果良好。3.建立了高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培测定人体尿液中异黄蝶呤的分析方法。尿液经ENVI-18与732型阳离子交换柱串联萃取后,除去了大量干扰物质。采用IonPac AS21分析柱(2 mm×250 mm),以0.020mol/L NaOH溶液为淋洗液,流速为0.40mL/min,在优化的安培检测波形条件下,异黄蝶呤在0.005μg/mL~0.200μg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.9984,检出限为0.003μg/mL健康人及癌症病人尿液在2.00μg/mL和5.00μg/mL两个添加水平的平均回收率在95.4%~96.8%之间,相对标准偏差小于5%。此方法环保、快速、准确,可用于健康人与癌症病人尿液中异黄蝶呤的测定。4.运用高效液相色谱-荧光分析法对34个健康人,29个胃癌病人及14个其它癌症病人的尿样中黄蝶呤与异黄蝶呤进行测定,通过T检验发现,与健康人相比,胃癌及其它癌症病人尿样中黄蝶呤和异黄蝶呤的水平存在显著性差异,有可能是肿瘤潜在的标志物。5.采用三维荧光光谱技术获得了不同人群尿液的指纹图谱,对24个胃癌病人以及27个健康人的尿样进行了测定,结合主成分分析的投影判别法和聚类分析法对尿样三维荧光谱的特征参数进行了模式识别研究。结果表明,病人和健康人的尿样存在一定的差异,且主成分分析投影判别法和聚类分析法均能对样品进行较好的分离识别,从而建立了识别癌症病人以及健康人的尿液的简便方法。
其他文献
首先对超分子化学及其相关的知识进行了简要概述,在这一领域涉及含氮配体特别是含有吡啶衍生物的氮配体金属络合物的研究较热。多氮配体的配位化学发展一直倍受关注,它们与过渡
今年秋种,各地紧紧抓住土壤墒情适宜的有利时机,通过大力推广小麦规范化播种技术,狠抓深耕深松、足墒播种、播后镇压等关键技术措施落实,全省小麦适期播种面积扩大,播种质量
电化学传感器是化学传感器中研究较为成熟的一种,它是采用电化学效应将检测信号转变为电信号的化学传感器,电化学传感器在分析测定中有广泛的应用。含酶或蛋白质的生物传感器
α-亚麻酸是人体必需脂肪酸。本文以花椒籽油为原料,通过油脂的前处理,利用尿素包合技术、硝酸银络合技术,对花椒籽油中的α-亚麻酸进行分离纯化,使用气相色谱对产品进行分析检测
本征型自修复材料在理论上具有无限次的修复能力,因而受到广泛重视。然而,当前主要利用Diels—Alder(DA)反应所制备的热可逆自修复材料存在着严重缺陷,即热可逆修复温度高于材料
用置换法制备贵金属纳米材料是一种较为新颖的合成方法,它主要是利用较活泼金属或金属化合物与贵金属离子的电位差而发生置换反应,从而制备出贵金属纳米粒子或纳米复合材料。这种方法制备贵金属纳米材料不需要加入任何的封端剂和表面活性剂,制备方法简单而且合成出来的纳米材料表面清洁,近年来成为了制备贵金属纳米粒子和纳米复合材料的新方向。本文首先采用简单的溶剂法制备出形貌可控的Cu2O纳米粒子,然后通过柯肯达尔效应
江泽民同志在“七一”讲话中指出:“贯彻‘三个代表’要求,我们必须坚持党的工人阶级先锋队性质,始终保持党的先进性,同时要根据经济发展和社会进步的实际,不断增强党的阶级
作为三大通用塑料之一,聚氯乙烯(PVC)早已广泛应用于食品包装和饮用水管道中,在使用前或使用过程中,都会进行一次性或持续性的消毒处理,而作为常用消毒剂的含氯消毒剂由于其强烈
多孔聚合物的研究内容丰富,探索性强,在生物、医药、化工、环境等领域有着广泛的应用前景。如何控制物理结构、调节功能是多孔聚合物薄膜研究的重要内容。在方法学中如何控制孔
十八大以来,针对目前我国生态环境的现状以及满足社会主义市场经济更好发展的需要,党中央集体在战略全局的部署下,将生态文明建设提上国家发展日程,使之成为我国全方位发展的