异甘草素对小鼠肠系膜动脉舒张的作用机制研究

来源 :江南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rilinx_2009
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黄酮类化合物普遍存在于水果,蔬菜,谷物和红葡萄酒中,具有广泛的生物活性。研究表明,黄酮类化合物能降低中风、冠心病和癌症等疾病的发病率。异甘草素是一种具有查尔酮结构的类黄酮物质,具有血管舒张,抗血小板凝聚和抗过敏等作用。先前研究表明,异甘草素具有舒张大鼠主动脉,大鼠脑基底动脉等作用,但对于肠系膜动脉的作用还未有研究报道。本研究在此基础上,在离体组织水平上开展异甘草素对舒张小鼠肠系膜动脉的作用机制,在细胞水平上开展异甘草素对平滑肌细胞的作用机制。为异甘草素在舒张血管的基础研究提供参考。在离体组织水平上主要考察异甘草素对离体小鼠肠系膜动脉血管环张力的影响。以离体小鼠肠系膜动脉血管环为模型,考察累积浓度的异甘草素(0.1,0.3,1,3,10,30,100μM)对去氧肾上腺素(Phenylephrine,PE)预收缩的内皮完整和去内皮的血管环的舒张作用;考察内皮舒张因子对一氧化氮(NO)、前列环素对血管舒张的影响;考察累积浓度的异甘草素(0.1,0.3,1,3,10,30,100μM)对KCl预收缩的去内皮的血管环的舒张作用;考察L-型钙通道抑制剂硝苯地平对异甘草素舒张作用的抑制效果;考察K+通道抑制剂四乙胺(Tetraethylammonium,TEA)和伊比利亚蝎毒素(Iberiotoxin,ibtx)对异甘草素舒张作用的抑制效果。在细胞水平上主要考察异甘草素对小鼠肠系膜动脉平滑肌细胞膜电位的影响。使用激光共聚焦显微镜(LSCM)测定平滑肌细胞膜电位的变化。考察1,10,100nM三种浓度的异甘草素对平滑肌细胞膜电位的变化;考察特异性K+通道抑制剂ibtx对平滑肌细胞超极化的抑制作用。结果显示:1、异甘草素对小鼠肠系膜动脉血管环具有舒张作用,并且随着浓度的升高舒张作用越明显,呈浓度依赖性。2、异甘草素的舒张作用是非内皮依赖性的,与内源性的血管舒张因子一氧化氮和前列环素无关。3、异甘草素对通过KCl预收缩的去内皮血管环均有显著的舒张作用,说明异甘草素能通过抑制Ca2+内流,使血管舒张。4、L-型钙通道抑制剂硝苯地平预孵育血管环后,异甘草素对血管环的舒张效果明显降低,说明异甘草素的舒张效果有L-型钙通道的参与,异甘草素可通过抑制电压依赖性钙通道抑制Ca2+内流。5、非特异性BKCa通道抑制剂TEA预孵育血管环,能使血管舒张的作用显著降低;进一步采用特异性BKCa通道抑制剂ibtx预孵育血管环,亦能显著降低血管环的舒张效果,并且具有显著的统计学意义。说明异甘草素的舒张作用依赖于BKCa通道。6、异甘草素能使平滑肌细胞荧光强度变暗,使细胞发生超极化,并且随着异甘草素浓度的升高,超极化效果越明显,说明异甘草素能抑制Ca2+内流。7、特异性BKCa通道抑制剂ibtx能减弱平滑肌细胞超极化,说明异甘草素的舒张作用有K+通道的参与。
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