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目的:研究大麻素受体-2(CB2)激动剂对CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型的防治机制。方法;1、以CCl4诱导WT小鼠和CB2-/-小鼠肝纤维化模型,设WT对照组、CB2-/-对照组、WT模型组和CB2-/-模型组,腹腔注射CCl4(5m L/kg),首周剂量为10%,第二周起调整剂量为30%,每周3次,共16周复制肝纤维化模型。酶学法检测小鼠血清中ALT、AST表达水平,H&E染色及天狼星红胶原染色观察小鼠肝组织中炎症反应、肝细胞坏死情况及细胞外胶原沉积面积。2、腹腔注射CCl4诱导WT小鼠肝纤维化,实验分为对照组、模型组、AM1241干预组(3 mg/kg和9 mg/kg)与AM630+AM1241拮抗剂组(3 mg/kg),同样方法用CCl4复制肝纤维化模型。造模之日起,AM1241干预组(3 mg/kg和9mg/kg)与AM630+AM1241拮抗组(3 mg/kg)给予腹腔注射CCl4的同时还分别每天腹腔注射CB2受体激动剂AM1241(3 mg/kg和9 mg/kg)及CB2受体拮抗剂AM630+AM1241(3 mg/kg)。酶法检测小鼠血清中ALT、AST表达水平,H&E染色法和天狼星红胶原染色法观察小鼠肝组织中炎症反应、坏死情况及细胞外胶原沉积的面积;Real-time PCR技术检测CB2、TGF-β1、PDGF-B、α-SMA、Col-Ⅰ/Ⅲm RNA相对表达水平;免疫组织化学法检测α-SMA、collagen-Ⅰ/Ⅲ蛋白在肝组织中表达水平;蛋白印迹法(Western blot)检测CB2、p-ERK1/2、ERK1/2、p-CREB、CREB、Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平。结果:1.小鼠血清中ALT、AST水平及H&E、天狼星红胶原染色实验显示,CB2-/-对照组与WT对照组相比,小鼠血清中ALT、AST水平无明显变化(P>0.05),肝组织都无炎症反应和坏死情况,仅见少量胶原沉积,表达面积并无统计学意义(P>0.05),与WT模型组相比,CB2-/-模型组小鼠血清中的ALT、AST表达水平明显上升(P<0.05),肝组织炎症、坏死严重和胶原沉积面积增加(P<0.05);2.血清中ALT、AST表达水平及H&E、天狼星红胶原染色实验结果显示,模型组小鼠与对照组相比,血清中ALT、AST水平显著上升(P<0.05),肝组织炎症反应和坏死情况严重、胶原沉积面积增加(P<0.05)。与模型组相比,AM1241干预组(3 mg/kg和9 mg/kg)小鼠血清ALT、AST水平下降(P<0.05),肝组织炎症、坏死缓解和胶原沉积面积减少(P<0.05)。与AM1241干预组(3 mg/kg和9 mg/kg)相比,AM630+AM1241拮抗组(3 mg/kg)可逆转上述结果(P<0.05);3.Real-time PCR法和Western blot法显示,与对照组相比,模型组CB2 m RNA水平和蛋白水平表达明显升高(P<0.05);4.Real-time PCR法实验结果显示,模型组与对照组相比,小鼠肝组织TGF-β1、PDGF-B m RNA相对表达水平上调(P<0.05)。与模型组相比,AM1241干预组(3 mg/kg和9 mg/kg)小鼠肝组织TGF-β1、PDGF-B m RNA表达水平下调(P<0.05)。与AM1241干预组(3 mg/kg和9 mg/kg)相比,AM630+AM1241拮抗组(3 mg/kg)可逆转上述结果(P<0.05);5.Real-time PCR法和免疫组织化学法显示,与对照组相比,模型组小鼠肝组织α-SMA、Col-Ⅰ/Ⅲm RNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,AM1241干预组(3 mg/kg和9 mg/kg)肝纤维化小鼠肝组织α-SMA、Col-Ⅰ/Ⅲm RNA和蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。与AM1241干预组(3 mg/kg和9 mg/kg)相比,AM630+AM1241拮抗组(3 mg/kg)可逆转上述结果(P<0.05);6.Western blot法表明,模型组较对照组,小鼠肝组织中p-ERK1/2、p-CREB和Bcl-2蛋白表达水平上升,Bax和cleaved caspased-3蛋白表达水平下降(P<0.05)。与模型组相比,AM1241干预组(3 mg/kg和9 mg/kg)小鼠肝组织中p-ERK1/2、p-CREB和Bcl-2蛋白表达水平下调,Bax与cleaved caspase-3蛋白表达水平上升(P<0.05)。与AM1241干预组(3 mg/kg和9 mg/kg)相比,AM630+AM1241拮抗组(3 mg/kg)可逆转上述结果(P<0.05)。结论:1.CCl4诱导CB2-/-小鼠发生更严重的肝纤维化表明CB2受体在CCl4诱导的小鼠肝纤维化中具有抗肝纤维化的作用;2.CB2受体激动剂可缓解肝损伤和肝纤维化发展;3.CB2受体激动剂可缓解CCl4诱导的小鼠肝纤维化可能与其下调p-ERK1/2-p-CREB-Bcl-2信号通路,促进活化HSC凋亡有关。