紫草具有抗肿瘤、抗菌、消炎等重要的药用价值，紫草的这些药用价值源于紫草的一种重要次生代谢产物.紫草宁及其衍生物。紫草宁生物合成的基本途径已经清楚，其中很多与紫草宁合成相关的代谢酶及基因也被分离、克隆和鉴定。而且研究发现紫草宁生物合成受到光照、金属离子、激素(乙烯和茉莉酸等)、真菌诱导子等的影响，然而这些调控因子作用的分子机制还很不清楚。　　 乙烯是一种重要的植物激素，它对紫草宁的合成起着重要的调控作用，转录因子ERF(Ethylene Response Factor)既是乙烯信号通路的组分，同时也可能参与光信号对紫草宁合成的调控，因此乙烯信号与光信号对紫草宁合成的调节可能存在交叉，EIN3是乙烯信号转导途径中核内第一个转录因子，在拟南芥中EIN3能结合到ERF1基因的启动子从而调控该基因的转录，参与乙烯介导的防御反应。为进一步探讨乙烯信号转导途径和光信号途径对紫草宁合成调控的分子机制，本研究对紫草LeEIL-1(EIN3 like)基因进行了原核表达。首先构建了pET32a-LeEIL-1融合重组表达质粒，转化大肠杆菌BL21(DE3)PLysS，诱导表达了紫草LeEIL-1蛋白，并通过Western-blot进行了验证，为下一步验证紫草细胞中LeEIL-1蛋白和ERF的相互作用奠定了基础。　　 LeDI-2基因是紫草中克隆的在黑暗条件下优先表达的一个基因，在紫草宁的合成或分泌中起着重要的功能。为深入探讨该基因的表达特性及与紫草宁合成的关系，本研究根据已经获得的LeDI-2 cDNA，通过Genome Walking方法克隆了该基因的启动子所在区域(转录起始位点上游～5000bp序列)。序列分析表明，该启动子序列包含若干黑暗诱导元件-YTCANTYY，推测可能是YTCANTYY赋予了启动子暗诱导性。为进一步验证LeDI-2基因启动子的暗诱导特性，本研究构建了以不同启动子截短片段驱动GUS基因的表达载体，并进行了转基因分析。初步的转基因表达结果显示，带有YTCANTYY元件的LEDI-2启动子序列能够使GUS基因的表达具有黑暗诱导性。