论文部分内容阅读
为研究不同锰源在肉鸡肠道吸收的分子机制,选择320只临界缺锰状态的15日龄的商品代Arbor Acres(AA)肉公雏,按平均体重随机分为5个处理组,每组8个重复笼,每笼8只鸡,分别饲喂不添加锰的玉米-豆粕型基础日粮和添加了110mg/kg无机硫酸锰、弱络合强度有机锰(OW)、中等络合强度有机锰(OM)和强络合强度有机锰(OS)的五种日粮;分别测定肉鸡第21日龄和28日龄(处理的第7天和14天)时,每笼取3只鸡,肝门静脉处采样,测定肝门静脉血浆锰含量;并将所取三只鸡屠宰分别取样测定小肠各段(十二指肠、空肠和回肠)二价金属转运蛋白1(Divlent metal transporter 1,DMT1)、膜铁转运蛋白1(Ferroportin,FPN1)、相关氨基酸转运载体(中性氨基酸转运载体B0AT1和LAT1、碱性氨基酸转运载体rBAT和y+LAT1以及酸性氨基酸转运载体EAAT3)、小肽转运载体(PepT1)mRNA表达水平,以及DMT1和FPN1翻译蛋白表达水平的影响。结果表明:(1)肝门静脉血浆锰含量:在试验的第7天,强和中等络合强度有机锰组血浆锰含量显著高于弱络合强度有机锰组和无机硫酸锰组(P<0.05);弱络合强度有机锰组和无机硫酸锰组血浆锰含量又显著高于对照组(P<0.05);强和中等络合强度有机锰组之间以及弱络合强度有机锰组和无机硫酸锰组之间差异不显著(P>0.05)。在试验的第14天,锰处理显著增加了血浆锰含量(P<0.05);强络合强度有机锰组血浆锰含量显著高于中等络合强度有机锰组(P<0.05);中等络合强度有机锰显著高于弱络合强度有机锰组和无机硫酸锰组(P<0.05);弱络合强度有机锰组与无机硫酸锰组之间差异不显著(P>0.05)。结果提示,适宜络合强度有机锰吸收优于无机锰的吸收。(2)DMT1和FPN1的mRNA的表达水平:在试验的第7天,肉鸡十二指肠中DMT1和FPN1的mRNA表达水平显著高于空肠和回肠(P<0.05);与不添加锰的对照组相比,饲粮添加锰显著提高了肉鸡十二指肠的DMT1和FPN1mRNA以及空肠的DMT1 mRNA表达水平(P<0.05),但在各段小肠中不同处理组之间的DMT1和FPN1 mRNA表达量无显著差异(P>0.05)。在试验的第14天,肉鸡十二指肠和空肠DMT1和FPN1 mRNA表达水平显著高于回肠(P<0.05),十二指肠中DMT1和FPN1 mRNA表达水平显著高于空肠(P<0.05);与不添加锰对照组相比,添加不同形态锰显著增加了十二指肠和空肠中DMT1以及十二指肠FPN1 mRNA表达水平(P<0.05),而对回肠中DMT1 mRNA表达水平无显著影响(P>0.05);十二指肠中强和中等络合强度有机锰组DMT1 mRNA表达水平显著高于弱络合强度有机锰组和无机硫酸锰组(P<0.05);强络合强度有机锰组和中等络合强度有机锰组之间以及弱络合强度有机锰组和无机硫酸锰组之间均无显著差异(P>0.05)。结果提示,自然饲喂的肉鸡小肠中DMT1和FPN1 mRNA主要在小肠前段表达;添加锰显著增加了21日龄和28日龄肉鸡十二指肠和空肠的DMT1以及十二指肠FPN1mRNA表达;与弱络合强度有机锰组和无机硫酸锰组相比,强和中等络合强度有机锰组增加了28日龄肉鸡十二指肠的DMT1mRNA的表达。(3)氨基酸转运载体及小肽转运载体的mRNA的表达水平:回肠中氨基酸转运载体的mRNA表达水平在试验的第7天和第14天显著高于十二指肠(P<0.05);小肽转运载体(PepT1)的mRNA十二指肠表达水平显著高于回肠(P<0.05);添加不同形态锰对小肠各段的氨基酸转运载体及小肽转运载体mRNA表达水平无显著影响(P>0.05)。结果提示,小肠中氨基酸转运载体mRNA则主要在小肠远端表达,而PepT1 mRNA主要在小肠前段表达。(4)DMT1和FPN1的蛋白表达水平:在试验的第7天,强络合强度有机锰组十二指肠中的DMT1蛋白表达量显著高于其他处理组(P<0.05);而其余4个处理组之间DMT1蛋白表达量无显著差异(P>0.05);空肠和回肠中各处理组间DMT1蛋白表达量均无显著差异(P>0.05)。在试验的第14天,强和中等络合强度有机锰显著增加了十二指肠DMT1蛋白表达水平(P<0.05),而其余3个处理组间DMT1蛋白表达量无显著差异(P>0.05),空肠和回肠中各处理组间均无显著差异(P>0.05)。FPN1蛋白表达量在试验的第7和14天,十二指肠中添加锰组显著高于未添加锰组(P<0.05),空肠和回肠各处理组间的FPN1蛋白表达量均无显著差异(P>0.05)。结果提示,添加强络合强度有机锰促进了21日龄和28日龄肉鸡十二指肠DMT1蛋白的表达,而添加中等络合强度有机锰促进了28日龄肉鸡十二指肠DMT1蛋白的表达,添加锰促进了21日龄和28日龄肉鸡十二指肠FPN1蛋白表达。结论:在本试验条件下,(1)强和中等络合强度有机锰增加了肉鸡小肠锰的吸收,并显著高于弱络合强度和无机硫酸锰组。(2)十二指肠是肉鸡小肠DMT1、FPN1表达的主要部位。(3)PepT1基因主要在小肠前段表达,而回肠是肉鸡小肠氨基酸转运载体基因表达的主要部位。(4)二价金属转运载体可能参与调节锰的吸收,而氨基酸转运载体和小肽转运载体可能不参与有机锰的吸收转运。