论文部分内容阅读
目的：通过主动脉缩窄术诱导建立小鼠心肌肥厚模型，同时，构建LY-96基因敲除小鼠和心脏特异性LY-96转基因小鼠，以探讨LY-96在心肌肥厚及纤维化中的作用。方法：选取8-10周龄、体重23.5-27.5g的雄性C57BL/6野生型小鼠（WT）、LY-96基因敲除小鼠（LY-96KO，C57BL/6背景）、非转基因小鼠（NTG，C57BL/6背景）及心脏特异性LY-96转基因小鼠（LY-96TG，C57BL/6背景）为研究对象，通过对实验小鼠进行主动脉缩窄术（Aortic Binding，AB）建立心肌肥厚模型，分为假手术组（SHAM组）、模型组（AB组）。LY-96KO组及其对照组在术后4周检测相关指标，而LY-96TG组及其对照组在术后8周检测相关指标。首先运用超声心动图和血流动力学检测评价心功能；取材观察心脏大体形态并计算心脏重量与体重的比值（HW/BW）、肺脏重量与体重的比值（LW/BW）及心脏重量与胫骨长度比值（HW/TL）；心肌组织行HE染色观察心肌细胞横截面积，PSR染色观察胶原改变；实时荧光定量PCR检测各组小鼠心肌组织中心肌肥厚标志物（ANP、BNP、α-MHC、β-MHC、SERCA-2α）的mRNA表达水平。结果：主动脉缩窄术诱导的心肌肥厚模型组中，LY-96TG小鼠反映心功能的指标射血分数、短轴缩短率、dp/dt max降低的程度均小于NTG小鼠；心肌肥厚的指标左室舒张末内径、左室收缩末内径、室间隔厚度均明显低于NTG小鼠。而LY-96KO小鼠表现出相反的结果。取材发现LY-96TG小鼠的HW/BW和HW/TL明显低于NTG小鼠，LY-96KO小鼠的以上指标均比WT小鼠高。HE和PSR染色显示LY-96TG小鼠心肌细胞横截面积及纤维化程度明显小于NTG小鼠，而LY-96KO小鼠增加。实时荧光定量PCR显示与WT小鼠比较，LY-96KO小鼠心肌组织中ANP、BNP、β-MHC及纤维化标志物（Collagen Iα、Collagen III、TGF-β1、TGF-β2、CTGF）的mRNA表达水平增高，α-MHC、和SERCA-2α降低；而LY-96TG小鼠相反。结论：LY-96能改善压力负荷诱导的小鼠心肌肥厚模型的心功能，主要是抑制心肌肥厚及纤维化。