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研究背景动脉粥样硬化(AS)是缺血性心脑血管疾病主要的病理生理基础。临床研究发现不稳定性AS斑块内出血或斑块发生破裂是引起缺血性血管事件急性发作的主要原因。AS斑块内有病理性新生血管,这些血管的渗透性高、脆性大,易发生破裂,从而导致斑块内出血,引起急性心脑血管事件。研究证实炎症与斑块内新生血管的形成关系密切,炎症因子刺激斑块内部的血管新生。TLR4/NF-κB信号传导通路可通过刺激炎症细胞分泌炎症因子来介导炎症反应。有研究显示TLR4/NF-κB途径可能会诱导MMPs表达,从而参与AS的病理过程。研究表明AS内的多种MMPs含量升高。AS的动脉壁中MMP-2、MMP-9水平明显增加,且增加程度与病变严重程度正相关。Aliskiren是新发现的肾素抑制剂,可明显减少AS病变。研究证实RAAS激活后可以通过TLRs依赖的信号途径诱导Apo E-/-小鼠AS斑块的血管炎症,但其作用机制与途径尚不明确。目的:观察Aliskiren对动脉粥样硬化斑块内新生血管形成和斑块稳定性的影响,探讨Aliskiren是否通过抑制TLR4/NF-κB信号通路介导的炎症反应及MMP-2、MMP-9的生成来影响新生血管的形成,增强斑块的稳定性。方法:取30只健康雄性、8周龄的载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠,将其随机分为3组:模型组10只、Aliskiren低剂量组10只、Aliskiren高剂量组10只,另取C57BL/6小鼠10只作为对照组。Aliskiren低剂量组、高剂量组分别给予Aliskiren25mg/kg/d,50mg/kg/d灌胃;C57BL/6小鼠及模型组给予生理盐水灌胃1m L/100g/d,灌胃时间为12周。制作主动脉根部切片,免疫组化染色观察分析斑块内新生血管的密度;HE染色分析斑块形态,计算血管斑块面积、管腔面积;油红O染色观察斑内脂质成分含量;Masson染色观察斑块中胶原含量;ELISA检测血清中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1水平;RT-PCR法检测主动脉组织中MMP-2、MMP-9、TLR4 m RNA水平变化;Western Blot法检测主动脉组织中MMP-2、MMP-9、TLR4及NF-κB蛋白水平变化。结果:1.血脂测定:模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C浓度较对照组明显升高(P<0.05);Aliskiren低剂量组和高剂量组小鼠血清TC、TG、LDL-C浓度与模型组无明显变化(P>0.05)。2.HE染色:模型组小鼠主动脉AS斑块形成显著,管腔狭窄较重,动脉内膜不连续、不光滑,内皮细胞部分缺失。与模型组相比,Aliskiren低剂量组和高剂量组斑块面积、斑块面积/管腔面积比值明显降低(P<0.05);与Aliskiren低剂量组相比,Aliskiren高剂量组降低更显著(P<0.05)。3.油红O染色:模型组小鼠主动脉AS斑块内红染的沉积的脂质量大。Aliskiren低剂量组和高剂量组斑块内脂质含量较模型组明显减少(P<0.05);与Aliskiren低剂量组相比,Aliskiren高剂量组降低更显著(P<0.05)。4.Masson染色:模型组小鼠主动脉斑块内蓝染胶原量少。与模型组相比,Aliskiren低剂量组和高剂量组斑块内胶原含量增加明显(P<0.05);与Aliskiren低剂量组相比,Aliskiren高剂量组增加更显著(P<0.05)。5.斑块内新生血管的密度:模型组可见大量的棕褐色的颗粒,CD34阳性表达多。Aliskiren低剂量组和高剂量组新生血管较模型组显著减少(P<0.05);与Aliskiren低剂量组相比,Aliskiren高剂量组新生血管减少更显著(P<0.05)。6.TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1水平:与对照组相比,模型组TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,Aliskiren低剂量组和高剂量组模型组TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1水平明显降低(P<0.05),Aliskiren高剂量组降低更明显(P<0.05)。7.主动脉组织中MMP-2、MMP-9、TLR4 m RNA表达水平:与对照组相比,模型组MMP-2、MMP-9、TLR4 m RNA表达明显升高(P<0.05);与模型组相比,Aliskiren低剂量组和高剂量组模型组MMP-2、MMP-9、TLR4 m RNA表达明显降低(P<0.05),Aliskiren高剂量组降低更明显(P<0.05)。8.主动脉组织中MMP-2、MMP-9、TLR4及NF-κB蛋白表达水平:与对照组相比,模型组MMP-2、MMP-9、TLR4及NF-κB蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,Aliskiren低剂量组和高剂量组MMP-2、MMP-9、TLR4及NF-κB蛋白表表达明显降低(P<0.05),Aliskiren高剂量组降低更明显(P<0.05)。结论:1.Aliskiren能够减少AS斑块内新生血管的形成,增强斑块的稳定性。2.Aliskiren可能是通过抑制TLR4/NF-κB信号通路介导的炎症反应及MMP-2、MMP-9的生成来影响新生血管的形成,增强斑块稳定性。