小菜蛾hsp70基因的克隆及其在抗、敏品系中热激表达差异研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:sikongshan
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
小菜蛾是世界性十字花科的重要害虫,也是重要的模式昆虫。本文以小菜蛾为研究对象,进行热休克蛋白70基因的克隆及其mRNA表达的初步研究,为以后的小菜蛾抗逆性和HSP70功能研究奠定基础。本研究利用RT-PCR和RACE技术,以小菜蛾四龄幼虫和成虫为材料,成功克隆了多条hsp70基因片段序列,并最终获得8条hsp70基因全长序列;然后利用荧光定量PCR技术检测1条已知hsp70基因和其中3条hsp70基因在小菜蛾抗性和敏感品系中mRNA水平的热激表达差异。本研究的结果如下:(1)分别以福州和日本小菜蛾经热激四龄幼虫和成虫及未经热激的成虫为材料,利用RT-PCR和RACE技术进行hsp70基因的同源克隆,共得到18个片段序列,经NCBI网站Blast比对,均属于hsp70基因的片段。(2)上述hsp70基因的片段可对应拼接处6条hsp70基因全长序列,经NCBI网站Blast比对,与亲缘关系较近物种的hsp70基因序列的同源性基本上都在80%以上。其中以福州小菜蛾为材料获得的3条序列均可翻译为629aa长度的蛋白,以日本小菜蛾为材料获得的3条序列均可翻译为664aa长度的蛋白,它们与已登录小菜蛾HSP70序列的同源性分别为91%-94%和98%以上。(3)根据hsp70基因全长序列设计5’端ORF外的两条引物,分别以福州小菜蛾经热激四龄幼虫和成虫为材料,利用RACE技术成功克隆了2条包括ORF的hsp70基因序列,分别可翻译669aa和667aa长度的蛋白,它们与已登录小菜蛾HSP70序列的同源性分别为98.8%和98.6%。(4)根据已登录小菜蛾hsp70基因序列和以福州小菜蛾为材料获得的3条hsp70基因序列分别设计特异性引物,利用荧光定量PCR技术检测它们在小菜蛾抗性和敏感品系中mRNA水平的热激表达差异。结果表明:经过热激后,hsp70基因的mRNA表达量均显著提高,且42℃热激的诱导幅度远大于37℃热激的诱导幅度;25℃时,hsp70基因mRNA表达量成虫多高于四龄幼虫,经过热激后,除个别例外,hsp70基因mRNA表达量成虫显著高于四龄幼虫;在小菜蛾雌雄之间,hsp70基因mRNA表达量在整体上并未表现出明显的差异;敏感品系小菜蛾的hsp70基因mRNA表达量显著高于抗性品系小菜蛾。
其他文献
现如今教学体系中,教师需要掌握具体的教学大纲,并使用自己特有的教学方式来组织开展教学工作,这种教学方式的应用要结合学生的实际情况,体现出针对性,而不能盲目地开展教学工作。数学课堂的教学本身不是一项简单的工作和任务,其中可能会存在一些复杂的问题需要去解决,涉及的知识点数量又比较多,采取问题导学法能够更好地帮助学生进入学习的状态,了解学生的特点之后,结合学生的特点去创设具体的教学情境,帮助学生进入学习
期刊
历史与文学的最大不同就是历史是对现实的搬运,是对一段特定时期人们生产生活方式的真实解读。人们可以通过历史去基本还原一段自己没有经历过的岁月,去了解和感受先人的生活方式,同时也能在一定程度上感受到当代与过去的区别。通过解读历史事件和人物,人们能够获取很多对现实有益的经验,从而更好地服务当代人的生活。而文学,尤其是现实主义风格的文学作品,绝大多数都是披着历史外衣的自由想象,现实主义文学作品可以在
期刊
水生蕨类满江红(Azolla)用做肥料、饲料和饵料在我国已有数百年的历史。近十多年来,人们发现满江红在环境保护和航天器的生命保障系统方面也有诱人的应用前景。满江红的叶腔内栖息着固氮蓝细菌(cyanobacteria,又称蓝藻)。近年来的研究发现细菌可能是满江红-蓝细菌共生体中的第三个共生伙伴。因此,它被认为是研究植物-微生物相互作用的模式生物。本研究用茎尖培养法取得表面无菌的小叶满江红(Azoll
在《白鹅》同课异构的教学中,我看到了文本解读应有的视野和深度。两位老师都能立足教材本身,带领学生理解内容、学习表达、体会情感,这才是教儿童学语文应有的样子。更令人欣喜的是,从丰子恺的《白鹅》到叶·诺索夫的《白公鹅》,从丰子恺的文字到漫画,从《白鹅》到丰子恺……这样的打开与联结、丰富与拓展,自然让《白鹅》的教学变得气象万千,阅读也因此不断走向更深处。
期刊
随着染色体构象捕获及其衍生技术的发明与发展,表观遗传学不再局限于平面的研究,基因的远距离相互作用和细胞核的三维空间构象成为研究的热点。染色体地域间的交叉导致基因的远距离相互作用,而这种相互作用使基因的空间构象发生动态变化。相互作用的基因间是否存在功能上的联系?基因空间构象的动态变化与基因的表达有没有直接关系?这些疑问成为此领域亟待解决的问题。本文以上述疑问为研究目的,以多巴胺合成通路基因为研究对象
草酸是核盘菌等病原菌分泌的一种致病毒素,相关研究表明,油菜等作物对草酸的抗性与对核盘菌的抗性保持高度一致,故可将草酸用于筛选油菜菌核病的抗病性。前期通过半定量RT-PCR佐证了基因芯片预测的草酸胁迫下,拟南芥基因APX1及TMS1表达上调结果。APX1基因编码的植物抗坏血酸过氧化物酶(APX)主要存在于叶绿体与胞质中,以抗坏血酸(AsA)作为主要电子供体清除植物细胞中的H2O2,达到保护细胞的目的
CaSC1,即辣椒倍半萜环化酶,是辣椒醇(Capsidiol)植保素代谢过程中催化法尼基焦磷酸(FPP)合成5-epi-Aristolochene的一个关键酶,在辣椒倍半萜植保素合成中起重要的调节作用。CaSC1在紫外线的诱导作用下表达,但对其诱导表达的分子机制还不很清楚。本研究从辣椒基因组DNA中分离获得了CaSC1的相应启动子,并利用农杆菌介导的烟草叶片瞬间表达系统,通过deletion缺失突
"创新、协调、绿色、开放、共享"的新发展理念是习近平新时代中国特色社会主义经济思想的主要内容,是当前阶段我国经济破解发展难题、厚植发展优势的重要抓手。作者在深入理解新发展理念理论内涵的基础上,梳理了新发展理念五个方面单一维度指标评价和综合指标评价的相关文献,发现目前单一维度指标评价研究深浅不一,综合指标评价研究缺乏系统性,进而提出了分层次的宏观-微观新发展理念指标评价体系,并建议引入舆情大数据作为
唐代吴地经济渐趋繁荣,与全国各地发生了广泛的联系,并产生了深远的影响。尤其是中唐以后,吴地几乎成了唐朝整个国家的经济命脉,在全国财政收入中占有不可替代的地位。我们推测,造成吴地经济发展较快的原因也许与文化有一定的关系。吴地人历来有浓厚的宗教信仰情结,重视教育,
会议
固废领域虽然还未出现普遍性的重大波折,但近期财政部对垃圾焚烧补贴的答复结合近几年愈演愈烈的低价竞争,也让人对垃圾焚烧市场不无担心。而对于同为重资产布局重地的危废领域还能火多久?"十三五"绝对是中国经济发展历史上一个特殊的五年,相信很多年后还会经常回顾这五年的转折点。宏观上的,国内我们提出两山论和建设生态文明,以及要面对产业结构性升级和GDP增速的逐渐下移,而外部
期刊