miR-183表达失衡诱导子宫内膜细胞抵抗失巢凋亡的作用及分子机制研究

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目的:探讨子宫内膜异位症(Endometriosis,EMT)患者在位和异位子宫内膜细胞中miR-183的表达差异,探究miR-183可能的靶基因,筛选特定靶基因进行初步验证,深入分析miR-183及其靶基因调控子宫内膜细胞失巢凋亡的分子机制,以期进一步揭示子宫内膜异位症的发病机理。方法:①收集新鲜未经治疗的EMT患者在位子宫内膜组织和异位病灶及无EMT患者的子宫内膜作为对照组织标本;②采用苏木素-伊红染色(HE染色)对实验组(31例EMT在位内膜以和异位病灶)和对照组(32例无子宫内膜异位症患者的子宫内膜)进行形态学研究,TUNEL染色和线粒体活性氧检测检测组织标本细胞凋亡情况,并比较分析组间凋亡指数(apoptosis index,AI);③采用Real time PCR检测两组内膜标本中miR-183的表达情况,并分析组间表达差异;④利用生物信息学技术,联合TargetScans,miRanda,PicTar三个数据库预测miR-183的靶基因,选择靶基因EGR1进行初步验证,采用Real time PCR法检测两组标本中miR-183靶基因EGR1的表达情况。结果:①TUNEL染色结果:EMT组异位病灶组织细胞AI低于在位子宫内膜和对照组子宫内膜,差异具有统计学意义(p <0.05);EMT组在位子宫内膜组织细胞的AI与对照组子宫内膜的AI差异无统计学意义(p>0.05);②线粒体活性氧族检测结果:EMT异位病灶组织线粒体的荧光强度达低于EMT在位内膜和对照组内膜,差异具有统计学意义(p<0.05);③miR-183在EMT组的异位病灶的表达低于在位和对照组子宫内膜,差异具有统计学意义(p<0.05);miR-183在EMT患者在位子宫内膜与对照组子宫内膜的表达差异无统计学意义(p>0.05);④靶基因EGR1在EMT组异位病灶表达高于EMT组在位内膜和对照组子宫内膜,差异具有统计学意义(p<0.05);靶基因EGR1在EMT组在位子宫内膜与对照组子宫内膜的表达差异无统计学意义(p>0.05)。结论:EMT患者异位病灶组织细胞的miR-183表达显著下调,在位内膜组织细胞miR-183的表达无显著变化,并且异位病灶组织细胞的靶基因EGR1表达显著上调,这说明失巢后的病灶组织细胞削弱了其对靶基因EGR1的负性调控作用,导致EGR1在EMT异位病灶组织细胞表达上调,进而诱发失巢的子宫内膜细胞产生抵抗失巢凋亡的能力,使子宫内膜细胞在盆腔内种植,并形成相应病灶,引发一系列临床症状。
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