论文部分内容阅读
普洱茶是我国较为常见的茶叶冲泡饮料,因其独特的口感、公认的保健功效、以及其独特的茶文化而备受消费者的青睐。普洱茶的保健作用在于其中丰富的抗氧化活性物质,例如黄酮、多酚、茶多糖、茶色素,以及一些其他的发酵产物。由于加工工艺的不同,使得不同品种的普洱茶从成份、气味和滋味上表现出一定的差异,这些差异又直接导致了其健康生理功效的显著不同。因此,在普洱茶的研究当中,对产品的差异性进行研究也具有重要意义。本研究以两种不同品系的普洱茶叶产品,即未经发酵工艺的普洱生茶（也称作普洱绿茶、普洱未发酵茶）和经过发酵工艺的普洱熟茶（也称作普洱红茶、普洱黑茶、普洱发酵茶）作为研究对象,对普洱茶菌种的多样性、茶汤的抗氧化活性及抗氧化活性成分含量,同时通过普洱茶灌胃动物进行减肥降脂功效和对肠道菌群影响进行研究。具体研究内容及结果如下:（1）不同年份普洱生茶和熟茶菌种多样性分析:选取2010年产、2014年产、2018年产的普洱熟茶和2016年产的普洱生茶作为研究对象,取样送检测序获得菌种多样性的结果。结果表明,2018年产的普洱熟茶和2016年产的普洱生茶的菌群比较相似,其中丰度较高的菌属是:葡萄球菌属（Staphylococcus spp.）分别占32.68%和38.74%;考克氏菌属（Kocuria spp.）分别占12.86%和12.82%;短杆菌属（Brevibacterium spp.）分别占17.97%和9.84%;小短杆菌属（Brachybacterium spp.）分别占7.48%和7.19%。在年份较为久远的2014年产和2010年产的普洱熟茶中,以上的葡萄球菌属、短杆菌属、小短杆菌属丰度均显著下降,分别对应降至12.13%和15.49%、1.51%和2.42%、0.73%和1.66%。但盐单胞菌属（Halomonas spp.）却从不足2%显著升至46.37%和21.65%,菌种多样性分析表明普洱茶在渥堆发酵过程与否对细菌的丰度影响不大。此外,通过对普洱熟茶中可培养的优势菌进行分离鉴定,发现其中优势菌都是芽胞杆菌。（2）普洱生茶和熟茶的浸提条件优化以及体外抗氧化性:选取2016年产的普洱生茶和2016年产的普洱熟茶作为研究原料,通过一系列梯度的浸提温度和浸提时间实验,以总黄酮总多酚作为参照指标,得到90℃/50min的最佳浸提条件。并基于此条件和一般泡茶条件作比较,分别测得其体外抗氧化指标,即DPPH、ABTS、FRAP的指标。其中最优条件下的普洱生茶比普洱熟茶的体外抗氧化指标分别为8.70倍、3.31倍、3.04倍,一般泡茶条件下分别为1.89倍、4.01倍、4.02倍。二者的主要抗氧化活性成分含量,即总黄酮、总多酚、咖啡因、游离氨基酸,其中最优条件下的普洱生茶比普洱熟茶的成分分别为4.75倍、2.48倍、1.40倍、3.16倍,一般泡茶条件下的普洱生茶比普洱熟茶的成分分别为2.71倍、2.94倍、2.53倍、5.93倍。（3）普洱生茶和熟茶对高脂饮食小鼠的减肥降脂功效研究:根据不同饲喂时间（4周、8周）、不同饲料（普通饲料、高脂饲料）、不同饮水条件（普通饮水、饮普洱生茶、饮普洱熟茶）,将C57BL6/L小鼠分为12组。结果发现普洱生茶和熟茶对高脂小鼠的TC、TG指标都有显著抑制作用（P＜0.001）,普洱熟茶对HDL-C指标有显著提高的作用（P＜0.001）,普洱生茶对LDL-C指标有显著抑制作用（P＜0.001）,普洱生茶组表现出对SOD指标有显著提高的效果（P＜0.001）,而普洱生茶和普洱熟茶对MDA、GSH均未表现出影响。肝脏肾脏组织的HE切片中观察到,普洱生茶和熟茶对肝脏的浸润作用和肾周脂肪的大小均表现出显著抑制作用。（4）普洱生茶和熟茶对高脂饮食小鼠肠道菌群影响的研究:通过普洱生茶和熟茶对高脂饮食肥胖小鼠进行灌胃干预并采取一般饮食小鼠和生理盐水灌胃作为对照,对以上12组小鼠的肠道菌群的V3-V4区域测序获得其菌种多样性数据。分析结果如下:能够同时受到普洱生茶和普洱熟茶影响的菌属有乳酸杆菌属（Lactobacillus spp.）、拟杆菌属（Bacteroides spp.）、罗姆布茨菌属（Romboutsia spp.）。乳酸杆菌属（Lactobacillus spp.）的丰度在4周的正常组中从0.25%分别提升至6.25%和5.02%,4周的高脂组中从1.79%分别升至26.71%和54.65%;拟杆菌属（Bacteroides spp.）的丰度在8周正常组中从11.44%分别升至23.47%和50.34%,在8周高脂组中从0.08%分别升至45.87%和29.80%,罗姆布茨菌属（Romboutsia spp.）的丰度在8周高脂组中丰度分别从由23.01%降至0.48%和未检出。此外,在8周组中仅普洱生茶能够将阿克曼氏菌属的丰度从1.53%提升至15.12%;在8周高脂组中仅普洱熟茶能够将乳酸杆菌属从0.08%提升至53.30%,以上结果充分说明了长期饮用普洱生茶和普洱熟茶能显著改善肠道菌群,达到健康调节的功效。