荧光—超声纳米泡在小鼠肿瘤模型中的研究

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超声造影剂是一种可以显著增强医学超声诊断信号的试剂。除了作为超声成像诊断试剂以外,它还可以用于治疗,作为药物和基因的控制释放载体。目前常用的超声造影剂是微泡造影剂,其在分子显像和靶向治疗方面得到了广泛应用。但是,由于微泡类造影剂直径比较大,不能穿过血管内皮间隙,因而限制了其对血管外疾病的诊断。纳米级造影剂因其粒径小、穿透力强等优点,已成为近年来纳米诊断和医学领域的研究热点。本文建立了小鼠皮下瘤模型,并用它研究了荧光-超声纳米泡在体内的超声成像和荧光成像情况,所得的结果在一定程度上为早期肝癌的诊断和治疗研究提供了一种新方法。主要完成的研究工作有:1)建立了Balb/C小鼠H22皮下瘤模型。H22皮下瘤生长速度快,增殖比率也高,因而在后续动物实验中应采用早期肿瘤进行超声和荧光成像实验。本实验所建立的皮下肿瘤模型同样也适用于裸鼠,并具有很好的重复性,其性质也很稳定,为后续的动物实验奠定了良好基础。2)体内超声成像研究表明尾静脉注射后可以观察到整个肿瘤的周围边界都得到了增强,并与肿瘤实体的无超声反射区形成一个封闭的内暗外亮不规则的轮廓,超声效果可以持续保持在2h以上。这说明纳米泡溶液不仅具有超声成像功能,还在动物肿瘤模型中对肿瘤组织有一定的靶向作用。荧光-超声纳米泡具有类似的超声成像结果。3)体外荧光分析和细胞毒性实验结果表明低剂量的荧光-超声纳米泡溶液无明显细胞毒性。4)考察了荧光-超声纳米泡的体内荧光成像情况。结果表明荧光-超声纳米泡可以通过EPR效应选择性的富集在皮下肿瘤的位置,肿瘤区的荧光信号在注射后1h左右可以达到最高值,并可持续保持24h以上,但会随着时间的延长而减弱,24h后的荧光信号比注射前肿瘤区的信号高很多,而且荧光覆盖的肿瘤区域比肿瘤的实际大小要大。进一步研究发现,荧光-超声纳米泡在体内主要分布在肿瘤和膀胱中,因此其潜在生物毒性低。
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