本文研究工作分为两部分： 第一部分：通过采用聚乙二醇修饰技术对rt-PA进行分子结构的改造，减缓其在体内的清除，以延长该药的半衰期。本文即为该课题的初期阶段研究内容。 目的：明确聚乙二醇修饰技术能否实现对rt-PA分子结构的改造，初步探讨获得rt-PA聚乙二醇单修饰产物的反应模式。寻找合适的方法和条件对上述反应产物进行分离纯化。观察聚乙二醇修饰rt-PA后的产物溶栓活性保留情况。 方法： ①通过SDS-PAGE电泳检测方法，分别观察sc-PEG-20k，Mal-PEG-20k在不同条件下修饰rt-PA，所获得的产物组成情况。 ②采用阳离子交换色谱技术，并结合SDS-PAGE电泳检测，观察阳离子交换色谱技术对rt-PA修饰产物的分离纯化效果。 ③采用纤维蛋白琼脂糖平板法，评价rt-PA修饰产物的体外溶栓活性情况。 结果： ①SDS-PAGE电泳检测结果提示：sc-PEG-20k修饰rt-PA反应生成多种不同修饰度的rt-PA修饰产物混合物；Mal-PEG-20k修饰rt-PA可以获得单一的rt-PA单修饰产物。 ②采用阳离子交换色谱技术能够实现对rt-PA单修饰产物的初步分离。 ③Mal-PEG-20k修饰rt-PA，其单修饰产物的体外活性约为rt-PA的40％。 结论： ①采用聚乙二醇化学修饰技术可以在分子水平上实现对rt-PA化学结构的改造。 ②采用特异性聚乙二醇修饰剂(如Mal-PEG)对rt-PA进行化学修饰较采用普通型聚乙二醇修饰剂(如sc-PEG)可能更容易获得rt-PA单修饰转化产物。 ③阳离子交换层析技术可以较好的实现对上述反应产物的初步分离。 ④Mal-PEG-20k修饰rt-PA的单修饰产物，其体外溶栓活性较未修饰rt-PA有所减低。 第二部分：探讨缺血性卒中患者双侧颈动脉弹性相关参数，与卒中明确危险因素数目及脑动脉狭窄程度的相关性。 资料和方法：前瞻性收集缺血性卒中患者52例，所有患者均详细评估危险因素情况，行头CT动脉造影检查明确脑动脉狭窄情况。采用血管回声跟踪技术(echo-tracking)测定双侧颈动脉弹性相关参数：僵硬度(B)、弹性模量(Eρ)和顺应性(AC)。采用下述三组分组方法，探讨颈动脉弹性相关参数同脑动脉狭窄程度及心血管病危险因素之间的关系。第1种分组方法：根据脑动脉狭窄率分成2组：Ⅰ组(轻度狭窄组，27例)；Ⅱ组(中重度狭窄组，25例)。第二种分组方法：根据心血管病危险因素数目分成3组：Ⅰ组(≤1个，8例)；Ⅱ组(2个，12例)；Ⅲ组(3个，32例)。第三种分组方法：比较β值最高四分位区间和β值最低四分位区间中重度脑动脉狭窄发生率之间的差异。 结果：两个独立样本的t检验结果显示：脑动脉轻度狭窄组和中重度狭窄组在高血压病史、血糖、甘油三酯和LDL-C及双侧颈动脉僵硬度(β)和双侧颈动脉弹性模量(Eρ)等因素方面，差异具有统计学意义(P<0.05)。单因素方差分析结果显示：具有多个心血管病危险因素数目(≥3个)较具有单个或两个心血管病危险因素的患者其颈动脉僵硬度(β)明显增加，差异具有统计学意义(P<0.05)。x2检验结果显示：β值最高四位区间和β值最低四位区间脑动脉中重度狭窄发生率之间比较差异具有统计学意义(P=0.04)。 结论 ①卒中患者具有的心血管危险因素数目越多，其颈动脉僵硬度增加可能越明显。 ②卒中患者颈动脉僵硬度越高，其脑动脉中重度狭窄的可能性越大。但本研究尚不能明确颈动脉僵硬度能否作为一个脑动脉中重度狭窄的独立危险因素。