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目的:本实验通过观察柴郁汤,芍甘汤和痛泻要方在ANIT造成的大鼠肝内胆汁淤积模型上的利胆作用以及采用血清药理学的方法探讨柴郁汤对CCl4成的大鼠原代肝细胞急性损伤的保护作用,证实了柴郁汤对实验性大鼠体内外的利胆作用,为临床用药提供实验依据。 方法:实验一 观察三种中药复方对ANIT造成的大鼠肝内胆汁淤积的利胆作用:健康wistar大鼠96只分为12组:正常对照组,胆汁淤积模型组（简称模型组）,柴郁汤低、中、高剂量组,芍甘汤低、中、高剂量组,痛泻要方低、中、高剂量组和熊去氧胆酸组。第1天对大鼠进行胆管插管,第2天早上正常对照组灌胃食用豆油,其余组灌胃4%ANIT,第4天早上各组均收集1小时胆汁;然后除正常对照组灌胃蒸馏水外其余各组灌胃相应的药物,晚上再灌胃1次,灌胃1小时后收集1小时胆汁。第5天早晚各灌胃1次,晚上灌胃1小时后收集1小时胆汁。 实验二 大鼠肝细胞原代培养方法的建立:健康雄性wistar大鼠每次1只,麻醉开腹,暴露肝门静脉和下腔静脉,用留置针插入门静脉,同时剪断下腔静脉。向门静脉内灌注39℃预热的无钙灌流液,直至肝呈灰白色,然后灌注39℃预热的0.025%的Ⅱ型胶原酶直至肝脏变成土黄色,将肝脏转移至盛有含5%血清的RPMI 1640培养液的烧杯中,用无菌眼科镊子不断抖动肝脏,肝细胞散落于培养液中而成肝细胞悬液。将盛有细胞悬液的烧杯置于37℃水浴振荡15 min,再置于冰水中冷却10 min。用200目筛网过滤,滤液收集在50 ml塑料离心管中,50 g/min,2 min,离心3次,末次弃上清后用生长培养液重悬细胞。对细胞进行形态学观察及测绘生长曲线。 实验三 大鼠药物血清的制备:体重（200±20）g的wistar大鼠10只,雌雄各半,设正常血清对照组（蒸馏水）,柴郁汤高、中、低剂量组,阳性药物组（熊去氧胆酸片）。每天灌胃2次,连续3 d。最后1次灌胃1 h后下腔静脉采血,3000 r/min