目的：初步探讨脑胶质瘤细胞对烷化剂类抗肿瘤药物耐药产生的机理,在诱导产生耐药细胞的基础上,探讨在耐药形成的过程中,干细胞基因与耐药基因表达的变化,并尝试找到两者之间的关系,从而为个体化治疗提供依据。方法：星形细胞瘤细胞由北京大学医学部惠赠,使用含有100ug/ml尼莫司汀(ACNU)的培养基持续培养5代,撤药后得到耐药细胞,通过CCK-8法比较药物诱导前后肿瘤细胞对尼莫司汀耐受性的差异；使用CD133抗体标记,流式细胞仪分析诱导前后CD133阳性细胞数量的变化；用实时荧光定量PCR的方法检测干细胞基因OCT4、Sox2、Nestin,耐药基因MGMT、MDR1以及p53基因表达量的变化；采用甲基化特异性高分辨率热溶解法(MS-HRM)检测MGMT基因启动子区域甲基化水平变化。结果：在诱导之后,星形细胞瘤细胞在尼莫司汀中增殖活力强于对照,半数抑制浓度明显提高,对药物ACNU的耐受性增强；诱导前后的星形细胞瘤细胞中CD133阳性细胞比例分别为9.74%和0.49%,CD133阳性细胞数量明显减少；经过药物诱导后,Sox2、Nestin基因表达下调,OCT4基因的表达下调1.84倍,具有显著差异；MGMT基因表达上调56.6倍,具有极显著差异,MDR1基因表达量没有变化；两组细胞中,MGMT基因启动子甲基化水平均无明显变化。结论：通过大剂量烷化剂药物ACNU短期诱导的方法可以获得耐药细胞；该方法得到的耐药细胞中,干细胞基因的表达下降,耐药基因MGMT的表达明显升高；MGMT基因启动子甲基化水平与其表达水平之间并不平行。