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目的：水疱口炎病毒（vesicular stomatitis virus, VSV）是一种很有前景的生物治疗方式，它能特异性诱导肿瘤细胞凋亡，目前对于它的研究主要集中在免疫应答系统（如IFN）、P53、RAS、p16/RB家族分子及相关通路上。Livin-beta是细胞内源性抗凋亡分子，对于Livin-beta及相关分子能否调控肺癌细胞中VSV的促凋亡作用及其具体机制尚不清楚，我们将对这一问题展开研究。方法：利用流式细胞术、TUNEL染色测定VSV对A549细胞（肺腺癌细胞）的致凋亡作用。利用流式细胞术、DEVD酶活性检测测定VSV处理A549细胞时加或不加zVAD-fmk（caspase全抑制剂）的凋亡率和caspase-3活性。使用western-blot测定不同剂量VSV处理后A549细胞中Livin表达量的变化。在A549细胞中，通过含Livin-siRNA下调及含Livin质粒瞬时和稳定过表达Livin，利用RT-PCR、real-time PCR、和western-blot验证干扰或过表达Livin的效果,观察转染处理前后细胞凋亡率的变化。通过DEVD酶活性检测细胞内caspase-3的活性。通过转染含Smac-siRNA及含Smac质粒，使A549细胞内Smac表达下调或过上调，采用与转染Livin组同样方式测定VSV处理前后凋亡率的变化及caspase-3活性。利用免疫沉淀技术分析Livin与Smac的相互作用。结果：VSV促进A549细胞凋亡，并且凋亡率与VSV作用时间呈正相关。实验都以未处理组为阴性对照，顺铂处理细胞为阳性对照，PI单染后使用流式细胞仪测定凋亡， VSV处理组与未处理组比较有差异，且有统计学意义（P＜0.001）；A549细胞凋亡率随VSV作用时间延长而增加，随感染复数加大而增加。加或不加zVAD-fmk，VSV处理组的caspase-3活性变化明显，前者caspase-3活性明显低于后者。通过western-blot检测到A549细胞中有Livin表达，且Livin表达量随VSV剂量不同而变化，阴性对照组中Livin呈高表达，给予0.1PFU/ml VSV处理组的Livin表达量明显降低，之后随着VSV剂量增加Livin表达增加。Livin-beta表达量降低的A549细胞，加用VSV后凋亡率比阴性对照组明显增加，caspase-3活性增强；Livin-beta表达量增多的A549细胞，加用VSV后凋亡率较阴性对照组减少，caspase-3活性也减弱。通过SiRNA－Smac下调Smac表达，并且Smac表达量降低的A549细胞，凋亡率减少，caspase-3活性减少。Livin高表达的细胞株中Livin与Smac结合更强。结论：A549肺癌细胞株中，Livin-beta能通过直接或间接调控caspase分子活性改变VSV的促凋亡效应，很可能是采用与Smac结合抑制其活性的方式调控caspase的活性，这可能是导致A549细胞抗拒VSV治疗的原因之一。