大白菜四倍体、三倍体和非整倍体的建立

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非整倍体的建立可以应用到植物的遗传研究和种质创新中。植物非整倍体是进行基因定位、构建连锁图谱的有效工具,远源杂交构建的非整倍体可以用来比较物种的亲缘关系和研究物种的起源进化。另外,非整倍体中的异源附加系、代换系是育种中的重要种质资源。而近年来因为人们对非整体在癌症中普遍存在的认识,非整倍体即不平衡的核型对基因组结构和表达的影响的研究受到重视。本论文以二倍体大白菜chiifu401-42为材料,在含1.5mg/L6-BA和0.25mg/LNAA的MS培养基上快繁,将得到的部分植株用秋水仙素加倍得到四倍体,四倍体与二倍体杂交得到F1代,分析了F1代的表型特征和细胞学特征,F1代自交同时与二倍体回交得到F2代,观察了F2代的表型和细胞学特征,所得结果如下:1.相同时间、相同培养条件、相同培养基成分,12个单株快繁得到的植株数目不同,方差为3.6。2.采用含有0.17mg/L秋水仙素的MS培养基上离体加倍和0.10mg/L秋水仙素溶液滴茎尖两种方法加倍的成功率分别为:12.5%、14.3%,两种方法加倍成功率差别不大,但是得到的植株的生活力有差别,离体加倍的方法得到的四倍体生活力强,自交可以收到种子,秋水仙素溶液滴茎尖得到的四倍体长势慢,开花晚,开花7天后就死了。3.用流式细胞仪测单细胞DNA含量的方法和子房体细胞染色体计数两种方法检验了F1代植株的倍性,其中得到56.50%的二倍体、35.30%的嵌合体和7.10%的三倍体,其中嵌合体细胞中含有30、20、14、15、18等几种染色体组成,推测嵌合体的形成是由三倍体有丝分裂不正常引起的;同时分析了F1代植株中出现不同倍性植株的原因,四倍体减数分裂的不正常是造成这种现象的主要原因,四倍体中减数分裂终变期含有单价体的比例为35.93%,含有四价体的比例为26.60%,减数分裂后期Ⅰ和后期Ⅱ出现染色体丢失的比例为33.33%,减数分裂后期Ⅱ形成三分孢子的比例为11.54%,形成多分孢子的比例为15.40%;另外,四倍体的花粉育性为92.2±6.3%较二倍体的98.6±0.9%也有所降低,推测F1代植株的倍性与这两个因素有关。4.F1代三倍体自交和回交得到了少量种子,F2代细胞学观察显示自交后代有1株为三倍体、1株为含有20-40条染色体的嵌合体,回交后代有1株为三倍体、2株为含有20.-40条染色体的嵌合体。
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