目的与背景 COX-2是将花生四烯酸转化为前列腺素的一种限速酶。主要在炎症过程中发挥作用。近期研究发现COX-2在结肠癌、胃癌中的表达增加。流行病学调查发现长期口服非甾体类抗炎药者能明显降低结肠癌的发病率。COX-2高表达的结肠癌患者，癌转移明显增加，说明COX-2在肿瘤转移中起作用。 目前研究已证明，肿瘤细胞主要是侵入肿瘤间质中新生血管和新生淋巴管而发生远处转移。肿瘤间质血管新生是肿瘤发展的必经阶段，与肿瘤的生长、局部浸润和远处转移相关，而血管内皮生长因子(VEGF-A)被认为是最重要的血管形成促进因子。肿瘤间质新生淋巴管与新生血管一样，在肿瘤的远处转移中起着重要作用，而VEGF-C已被证明与淋巴管的形成及淋巴结的转移密切相关。 该研究旨在探讨COX-2在人类乳腺癌组织中的表达及意义，COX-2的表达与乳腺癌转移的关系，并初步探讨其促进转移的可能机制。 材料与方法： 1.收集临床手术切除、石蜡包埋的癌前病变标本27例、乳腺癌标本98例、癌旁组织30例，制成4μm厚连续切片，做HE及免疫组织化学染色(SP)，观察在癌前病变、乳腺癌组织及癌旁组织中COX-2蛋白的表达情况，并将乳腺癌组织COX-2蛋白表达情况与其临床病理资料进行对比分析，结果用SPSS11.5软件包进行统计。 2.检测98例乳腺癌组织中VEGF-A、VEGF-C蛋白表达及微血管密度，比较COX-2蛋白表达与VEGF-A、VEGF-C蛋白表达及微血管密度的关系，结果用SPSS11.5软件包进行统计。 3.体外培养乳腺癌细胞株MCF-7，观察COX-2抑制剂NS-398对MCF-7细胞COX-2、VEGF-A、VEGF-CmRNA表达的影响。将细胞每孔106个细胞接种于6孔板。实验分3组，空白组、对照组、实验组，每组6孔。待细胞生长至接近80％融合时，空白组换液为2.5ml无血清培养液，实验组换液为2.5ml无血清培养液+2.5μl20mMol/L的NS-398，对照组换液为2.5ml无血清培养液+2.5μlDMSO。培养24小时后，RT-PCR检测各孔的COX-2、VEGF-A及VEGF-C的mRNA表达情况，并使用凝胶成像系统的灰度仪对图像进行分析，得出目标条带与β-actin光密度值与面积之积的比值，使用SPSS11.5软件包对比值进行分析。 结果： 1.98例乳腺癌中癌细胞表达COX-2蛋白者66例(67.3％)；30例癌旁组织COX-2阳性表达9例(30.0％)，阳性细胞主要为导管和腺泡上皮细胞。癌前病变27例，COX-2阳性表达5例(18.5％)，阳性细胞主要为不典型增生的导管上皮细胞。乳腺癌组织中COX-2蛋白表达明显高于癌前病变(P＜0.01)及癌旁组织(P＜0.01)。 2.COX-2在乳腺癌中的表达与患者的年龄、癌组织大体有无破溃、肿块大小、乳腺癌的组织学类型、癌组织有无炎症细胞浸润及癌组织有无坏死均无关(P＞0.05)。在组织学分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级中，COX-2阳性率依次为40.0％(10/25)、73.2％(41/56)、88.2％(15/17)，两两比较，Ⅰ级与Ⅱ级之间及Ⅰ级与Ⅲ级之间，COX-2表达有显著性差异(P＜0.01)。在临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ-Ⅳ期中，COX-2阳性表达率依次为36.4％(8/22)、75.0％(30/40)、76.5％(26/34)，两两比较，Ⅰ期与Ⅱ期之间及Ⅰ期与Ⅲ-Ⅳ期之间COX-2的表达有显著性差异(P＜0.01)。 3.乳腺癌组织中COX-2蛋白表达在淋巴结转移组(90.7％，39/43)明显高于未转移组(49.1％，27/55)(P＜0.01)。 4.COX-2蛋白在癌旁组织的表达与该病例的组织学类型、是否有淋巴结的转移、肿块的大小及癌旁组织是否有炎症细胞浸润无关(P＞0.05)，而与相匹配的癌组织中COX-2蛋白表达呈正相关(rs=0.432,P＜0.01)。 5.66例乳腺癌细胞COX-2阳性例中，随着COX-2蛋白表达强度的增加，VEGF-A的表达也增加，COX-2与VEGF-A蛋白表达呈正相关(r=0.864，p＜0.01)。 6.66例乳腺癌细胞COX-2阳性例中，随着COX-2蛋白表达强度的增加，VEGF-C的表达也增加，COX-2与VEGF-C蛋白表达呈正相关(r=0.753，p＜0.01)。 7.随着癌细胞COX-2蛋白表达的增强，微血管密度也随之增加，比较不同强度的COX-2蛋白表达组，各组间微血管密度均有显著差异(P＜0.05)。 8.培养乳腺癌细胞株MCF-7，加入COX-2抑制剂NS-398后，检测COX-2、VEGF-A、VEGF-CmRNA的表达，三者表达与对照组相比均明显减少(P＜0.01)。 结论： 1.从蛋白水平证明COX-2在癌前病变、乳腺癌及癌旁组织中表达增加。提示COX-2可能在乳腺癌发生、发展中起重要作用。研究结果为选择型COX-2抑制剂用于乳腺癌高危人群的预防提供了理论依据。 2.COX-2蛋白在乳腺癌的表达随着组织学分级及临床分期的升高而增加，提示COX-2可能参与了乳腺癌的进展过程。 3.COX-2蛋白表达与乳腺癌淋巴结转移密切相关。 4.COX-2蛋白表达与VEGF-A、VEGF-C蛋白表达呈正相关，与肿瘤间质微血管密度呈正相关。选择型COX-2抑制剂能够抑制乳腺癌细胞MCF-7中COX-2mRNA的表达，同时可见VEGF-A、VEGF-CmRNA表达下调，推测COX-2基因在乳腺癌细胞的过表达上调了VEGF-A、VEGF-C基因的表达，从而诱导了肿瘤间质血管和淋巴管的生成，促进了肿瘤的转移。提示抑制COX-2表达可能成为寻找抑制肿瘤间质脉管生成作用的新靶点。