水稻(Oryza sativa L.)两个光温敏雄性核不育相关基因的功能验证

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zyqtc1989
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光温敏不育水稻是一种重要的种质资源,其发现和利用使杂交水稻育种从三系转为两系成为可能,同时为更广泛的利用水稻亚种间杂交优势创造了条件。光温敏雄性核不育基因是两系不育系的核心元件,它与两系不育系的育性稳定性有最直接的联系。克隆光温敏不育基因,从分子水平阐明光温敏雄性不育的作用机理,对指导水稻两系杂交育种具有十分重要的理论和实践意义。   水稻突变体G392S、H122S是本实验室发现的两个光温敏材料。G392S为短日低温(反光温敏)不育;H122S为水稻Fl长日高温敏雄性不育。本实验室将反光温敏不基因rptms-2,水稻F1高温敏雄性不育基因ptms-122定位于Sa座位附近。本文主要在此基础上克隆这两个光温敏不育相关基因,并进行功能互补实验。本研究主要结果如下:   1.在定位基础上选定ORF13为rptms-2的候选基因,通过筛选基因组文库得到ORF13全长克隆。   2.为了通过功能互补试验确认ORF13功能,构建植物转化载体pCAMBIA1300-ORF13及pCAMBIAI300-ORFI3Li,用以转化突变体材料G392和T65,观察其后代在不同季节条件的表型。   3.分别在广州晚季和三亚冬季种植ORF13化体To代和TI代植株,其花粉和小穗育性得到恢复,光温不育特性消失,由此确认ORF13为rptms-2不育基因。   4.利用前人的定位结果及对材料的遗传分析,初步预测ORF7与ORF10为p tins-122候选基因。   5.为了通过功能互补试验确认ORF7与ORF10功能,构建植物转化载体pCAMBIA1300-ORF7和pCAMBIA1300-ORF10,用以转化T65,已获得转化苗,拟将其与突变体材料H122和H122S杂交,对其后代进行表型观察。
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