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本文主要从以下几部分展开论述: 第一部分 五甲基槲皮素对麻醉大鼠血流动力学的影响 目的:研究五甲基槲皮素对麻醉大鼠血流动力学的影响。方法:行股动脉和左心室插管术,记录LVSP,+dp/dtmax,-dp/dtmax,t-dp/dtmax,心率,收缩压,舒张压,脉压差,计算给药后各参数的变化百分率。结果:与空白组相比,溶剂对各指标均无明显作用;25,37.5,50 mg/kg PMQ给药后,对-dp/dtmax,t-dp/dtmax,收缩压,舒张压,脉压差无明显作用;给予25,37.5,50mg/kgPMQ,大鼠LVSP,+ap/dtmax,心率均有明显升高(n=6,P<0.05)。结论:PMQ对整体动物心脏有正性肌力和正性频率作用。 第二部分 五甲基槲皮素对3T3-L前脂肪细胞增殖的影响 目的:研究PMQ对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响。方法:常规培养3T3-L1前脂肪细胞,分别加入0.1,0.3,1,3,10,30,100,300μΜ的五甲基槲皮素,作用24,48,72小时后,以噻唑蓝比色实验(MTT法)检测细胞的增值情况。结果:与溶剂组相比,药物作用24小时,各浓度组PMQ对3T3-L1前脂肪细胞增殖无明显作用;药物作用48小时,100μΜ显著抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖;药物作用72小时,10-100μΜ浓度范围内的PMQ可明显抑制3T3-L1的增殖(P<0.05)。结论:随着PMQ与细胞共培养的时间的延长(从24小时-72小时),有效抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖的药物浓度降低,提示作用时间对药物效应有明显影响。 第三部分 五甲基槲皮素对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响及对脂肪细胞PPAR-γ表达的影响 目的:比较PMQ和罗格列酮对3T3-L1前脂肪细胞分化及 PPARγ表达的影响。方法:待细胞融合2天后,加用胰岛素诱导3T3-L1前脂肪细胞分化。分化的过程中全程给予0.1,0.3,1,3,10,30,100μΜ的五甲基槲皮素和1,10μΜ阳性药物罗格列酮。诱导分化第12天,油红 O染色,异丙醇洗脱后,570nm波长测值,定量分析细胞的分化情况;3T3-L1前脂肪细胞长至融合2天后,用胰岛素诱导其分化。分化过程中全程给予0.1,0.3,1,3μΜ的五甲基槲皮素和1,10μΜ罗格列酮。诱导分化第六天提取总RNA,以RT-PCR法检测细胞PPAR-γmRNA的表达量。结果:罗格列酮可明显促进脂肪细胞的分化( P<0.05);PMQ在3-100μΜ浓度范围内,明显抑制脂肪细胞的分化(P<0.05);PMQ和罗格列酮上调脂肪细胞PPAR-γmRNA表达(P<0.05),PMQ的促表达作用强度约为罗格列酮的30倍。结论:PMQ明显抑制脂肪细胞的分化,此作用与罗格列酮相反;PMQ增加脂肪细胞PPAR-γ mRNA表达,作用强度比罗格列酮至少高1个数量级。 第四部分 五甲基槲皮素对脂肪细胞脂联素mRNA表达的影响 目的:比较PMQ和罗格列酮对脂肪细胞脂联素 mRNA表达的影响。方法:3T3-L1前脂肪细胞长至融合2天后,用胰岛素诱导其分化。分化过程中全程给予0.1,0.3,1,3μΜ的五甲基槲皮素和1,10μΜ阳性药物罗格列酮。诱导分化第六天提取总 RNA,以 RT-PCR法检测细胞脂联素 mRNA的表达量。结果:PMQ和罗格列酮上调脂肪细胞脂联素 mRNA表达(P<0.05), PMQ的促表达作用强于罗格列酮。结论:PMQ增加脂肪细胞脂联素 mRNA表达,作用强度比罗格列酮至少高1个数量级。