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在我国大力发展海洋经济的形势下,海产养殖业的地位也日益凸显。鲍作为一种经济养殖产品,由于长期近亲繁殖和育种中一些不规范的操作,导致养殖鲍群体出现近交种质衰退、生产效益下降等问题,杂交育种在一定程度上是克服近交衰退、改良种质有效方法。胶原蛋白是鲍腹足中含量丰富的生物大分子,通过对杂交鲍进行胶原蛋白活性分析,不仅可以了解杂交鲍的种质特征,而且有利于提升了鲍利用的附加值。本论文采用从新西兰引进的黑足鲍作为父本,本土的皱纹盘鲍作为母本进行杂交,以亲本鲍和所获得的杂交鲍作为实验材料,对3种鲍的腹足胶原蛋白进行了生理生化性质的研究。通过水解胶原蛋白制备多肽的过程,确定水解制备鲍胶原多肽的最佳条件,并测定了3种鲍胶原蛋白多肽的体内外抗氧化活性。主要结果和结论如下:1.以皱纹盘鲍、黑足鲍及杂交鲍的腹足部分为原材料,对其营养组成进行了分析,并对胶原蛋白的提取方法及条件进行了探究,最终确定了提取效率较高的酸-酶法低温提取胶原蛋白,提取得到的胶原蛋白可达总胶原含量的80%。对提取到的胶原蛋白进行了一系列生理生化活性测定,结果显示皱纹盘鲍和杂交鲍的胶原蛋白由α1(110KDa)、α2(100KDa)、β链(210KDa)和y链(220KDa)四条肽链组成。黑足鲍可见三条带,分别为α1(110KDa)、α2(100KDa)和p链(210KDa),未见Y链。3种鲍胶原蛋白中相同组分的条带分子大小相同,并且黑足鲍的Q链的强度约为皱纹盘鲍和杂交鲍的2倍。通过测定氨基酸的组成发现鲍胶原蛋白中甘氨酸含量约为1/3,脯氨酸和羟脯氨酸的含量10%左右,胶原PI约为5.2。2.采用多种蛋白酶对提取的胶原蛋白进行水解,根据酶解液对O2-··的清除能力大小,确定了水解效率最高的中性蛋白酶为水解酶,利用Design-expert对中性蛋白酶水解胶原蛋白的条件进行了优化,得到线性回归拟合方程Y=65.42+ 0.35×A+1.16×B+1.27×C-0.14×AB-0.82×AC+1.17×BC-2.74×A2-1.58× B2-3.91×C2。水解最佳条件为最适pH 7.0;最适温度45℃;酶用量3230U/g;酶解时间4.2h。3.对中性蛋白酶水解得到的鲍的胶原蛋白多肽进行体外抗氧化活性的测定,实验表明杂交鲍和亲本鲍胶原蛋白多肽在总还原力、对自由基离子的清除能力上均表现出了较强的抗氧化性。4mg/ml黑足鲍的胶原蛋白多肽的总还原力(AT00=].803)和对·OH的清除能力最强(IC50=3.579 mg/mL),而杂交鲍对O2·清除率最高(IC50=1.150mg/mL)。4.对D-半乳糖致衰小鼠血清及肝脏MDA、T-SOD和GSH-Px含量进行检测,探究杂交鲍腹足胶原蛋白多肽在小鼠体内的抗氧化性的强弱。阴性对照组肝脏和血清中T-SOD和GSH-Px活力明显较空白组下降,而MDA含量升高明显。在饲喂鲍鱼胶原多肽之后,小鼠肝脏和血清中SOD和GSH-Px抗氧化酶的活力增强,并且使D-半乳糖诱导的MDA积累程度降低,同时也使胸腺的相对重量升高到正常水平。其中杂交鲍胶原肽对衰老小鼠肝脏T-SOD、肝脏和血清GSH-Px和MDA含量均有极为显著的修正功效(P<0.01)。以上结果表明杂交鲍胶原肽在自由基清除和体内抗氧化活性方面表现出一定的杂交优势,为鲍的功能性应用研究和杂交鲍的开发利用提供科学依据和理论基础。