近年来,我国可利用的淡水资源日益紧缺,同时存在大量的盐碱水资源未被利用,这些盐碱水域由于盐度高、碱度大、离子比例复杂等多重原因,使得能生存的水生生物种类比较稀少。尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)是我国淡水养殖主要对象之一,不仅生长速度快,对盐、碱环境耐受能力也较强,经驯化后可以在一定范围的盐碱水中生存生长,可作为耐盐碱养殖品种培育的重要候选对象之一。本论文以尼罗罗非鱼耐盐碱选育二代为材料,评估了幼苗急性盐碱耐受性能,慢性盐碱耐受性能及盐碱水中生长性能;比较在不同碳酸盐碱度(2、4、6 g/L NaHCO3)胁迫后不同时间(0、2、4、6、12、24、72 h)尼罗罗非鱼血氨浓度变化,并用荧光定量PCR方法检测氨代谢途径相关基因GS、GLS2、CA-5A、Rhcgl2和CPS1基因在不同组织胁迫过程中的表达变化及GS、CA酶活性变化,主要结果如下:(1)以尼罗罗非鱼盐碱驯化选育二代幼鱼为试验材料,通过急性致死试验比较它们在不同盐度组(18 g/L、20 g/L、22 g/L、24 g/L、26g/L)中的半致死盐度,碳酸氢钠(NaHCO3)碱度组(2 g/L、4 g/L、6g/L、8 g/L、10 g/L、12 g/L)中的半致死碱度,以及盐碱混合组(盐度10g/l、15g/l、20g/l,碱度2g/l、4g/l、6g/l)中的半致死盐碱度。试验结果表明,尼罗罗非鱼选育二代幼鱼96h的半致死盐度为21.809g/l,半致死碱度为8.514g/l,半致死盐碱度:10g/l盐度下,碱度为5.925g/l;15g/l盐度下,碱度为4.583g/l;20g/l盐度下,碱度为1.897g/l。选育二代幼鱼的96h半致死盐碱度与选育一代差异不显著(p>0.05),但都显著高于基础群体的96h半致死盐碱度(p<0.05)。(2)以尼罗罗非鱼耐盐碱选育二代为材料,通过慢性致死试验及在不同盐碱环境(s0a0、s10a0、s10a2、s10a4、s10a6)中生长对比试验,评估选育二代的盐碱耐受性能和生长性能。慢性致死试验结果表明,选育二代与对照组(非选育群体)的半致死盐度分别为57.37±1.56g/l、48.71±1.58g/l,半致死碱度分别为19.09±0.76g/l、16.32±0.45g/l。60d的生长对比试验结果表明,随着盐碱浓度增加,选育二代与对照组日均增重率都表现为下降趋势;在s0a0组中,选育二代日均增重率与对照组间差异不显著(p>0.05),在s10a0、s10a2、s10a4、s10a6组中,选育二代日均增重率均显著大于对照组(p<0.05)。本实验证明,选育后代的盐碱耐受性能和盐碱环境下的生长性能得到了提高。(3)为了理解尼罗罗非鱼在碳酸盐碱环境适应过程中氨代谢调节途径,本研究选取了5个氨代谢相关基因:谷氨酰胺合成酶(glutaminesynthetase,gs)、碳酸酐酶5a(carbonicanhydrase5a,ca-5a)、谷氨酰胺酶(glutaminase2,gls2)、氨甲酰磷酸合成酶(carbamylphosphate synthetase 1,CPS1)、氨转运蛋白(Ammonium transporter Rh type C-2 like,Rhcgl2),研究了急性碳酸盐碱度胁迫条件下,尼罗罗非鱼血氨浓度变化、氨代谢相关基因表达水平及其酶活性变化。结果表明,随碳酸盐碱胁迫浓度升高,尼罗罗非鱼血氨浓度上升,随时间推移呈先上升、后下降的变化趋势,在胁迫后12 h达到峰值。氨代谢相关基因在不同碱度下、不同组织中均有不同程度的上调表达,随着胁迫时间推移呈先上升、后下降的变化趋势,胁迫后12-24 h各基因表达水平显著升高,随后逐渐恢复到稳定水平;氨代谢相关基因具有一定的组织表达差异:Rhcgl2主要在鳃中表达,CA-5A、GS、CPS1主要在肝脏中表达,GLS2主要在肾脏和鳃中表达。碳酸酐酶和谷氨酰胺合成酶活性随胁迫碱度的升高而上升,碳酸酐酶、谷氨酰胺合成酶活性变化分别在鳃、肝脏中最为显著。研究结果表明,碳酸盐碱度胁迫会引起尼罗罗非鱼血氨水平升高,随着时间推移血氨水平下降,推测鳃、肝脏、肾脏中不同氨代谢基因共同参与调节氨代谢,在鳃中通过直接排氨,在肝脏中通过合成谷氨酰胺、尿素途径,共同调节降低血氨水平。