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背景与目的DNA错配修复（mismatch repair, MMR）基因在维持基因组稳定性中起关键作用。大部分的遗传性结直肠癌综合征由MMR基因种系突变引起，即遗传性非息肉病性结直肠癌（hereditary nonpolyposis colorectal cancer, HNPCC）。另外有10%-15%的散发性结直肠癌也是由错配修复基因hMLH1表遗传学失活所致。MMR功能障碍导致的结直肠癌表现为微卫星不稳定性（microsatellite instability, MSI）。既往研究表明，在HNPCC家族中，男性突变携带者患结直肠癌的风险高于女性突变携带者；在中国人HNPCC家系中也发现了类似情况。这种HNPCC发病率上的性别差异可能与雌激素有关。有研究报道绝经后雌激素替代治疗能降低MSI阳性结肠癌风险，因此推测雌激素可以预防MMR功能缺陷引起的结直肠癌。事实上，近年来大量临床研究已证实，雌激素对结直肠癌可能有预防作用，但是其机制仍不明确。根据以上临床现象，可以假设：雌激素可能通过影响结直肠细胞的MMR基因表达和功能来预防结直肠癌的发生。在进一步的研究中，我们首次发现雌激素和ERβ选择性激动剂能上调结肠细胞MMR基因的表达，并证实雌激素和ERβ选择性激动剂可以抑制正常结肠上皮及结肠癌细胞的增殖，并诱导结肠癌细胞的凋亡。本实验在前期研究的基础上，建立细胞MMR功能定量检测方法，探索雌激素对结肠细胞MMR功能的影响。材料与方法在质粒pEGFP-N1的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因起始密码子上引入错配，构建含有T-G错配的异源双链质粒及不含错配的同源双链质粒，用含错配EGFP的质粒转染结肠癌细胞株，只有修复错配才能产生有功能的EGFP，而转入同源双链质粒的细胞，作为对照得到EGFP相对表达值；用不同浓度的雌激素培养转染含错配EGFP的结肠细胞，然后在流式细胞仪下观察各绿色荧光细胞的数量和荧光强度，以反映雌激素对结肠细胞错配修复功能的影响。结果成功构建含有T-G错配的异源双链质粒及不含错配的同源双链质粒，建立了细胞错配修复活性定量检测体系；加入雌激素（雌二醇E2）后能增强转染后结肠癌细胞株SW480中的绿色荧光细胞的数量和荧光强度；E2能增加SW480细胞的EGFP相对表达值，且呈剂量依赖关系,提示E2能上调SW480细胞的MMR活性。雌激素能上调结肠细胞MMR功能。结论在pEGFP-N1的EGFP基因转录起始密码子上引入错配,所得到的异源/同源双链质粒系统可以用于定量检测体外培养细胞的错配修复功能;雌激素转染错配EGFP质粒后可提高结肠癌细胞株SW480的EGFP的相对表达值,从而证实雌激素能提高体外培养细胞的错配修复功能。