杜仲籽油制备及其内源性抗氧化物的研究

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杜仲籽中富含脂肪、蛋白质等营养成分和桃叶珊瑚苷、绿原酸等生理活性物质。杜仲籽整籽含油率为8%-15%,杜仲籽油富含多不饱和脂肪酸(90%以上),尤其是α-亚麻酸(60%左右),杜仲籽仁中的桃叶珊瑚苷的含量在8%左右,具有较高的食用及药用价值。目前对于杜仲籽油的研究还不够全面,由于杜仲籽剥壳困难,限制了杜仲仁油规模性的开发与利用。由于杜仲胶的存在,限制了整籽制备杜仲籽油的工艺开发。同时,杜仲籽中有益成分在杜仲籽油中的保留、杜仲籽油的氧化稳定性的提高以及杜仲籽中微量成分的分离与提纯等的具体的应用还需要做进一步研究。本课题研究了杜仲籽油的制油工艺、通过探究杜仲胶的溶解规律优化了混合溶剂提取杜仲籽油的提取条以及混合溶剂的配比、分析了杜仲籽中内源性抗氧化成分,为杜仲籽油的开发、利用、以及保存提供支持。由于杜仲籽剥壳困难,限制了杜仲仁油的规模性开发,整籽制杜仲籽油在制油工艺上更加简单。本课题对比分析了杜仲籽油和杜仲仁油品质,结果表明:杜仲籽油的酸价和过氧化值略低于杜仲仁油的,碘值和折光指数相差不大。二者的不皂化物含量有显著差别,其中杜仲籽油的不皂化物的含量为1.87%,杜仲仁油为0.84%。杜仲籽油和杜仲仁油所含的主要脂肪酸都差别不大,不饱和脂肪酸的含量在90%以上。其中亚麻酸含量在60%以上(杜仲籽油61.36%,杜仲仁油60.27%)。在微量成分含量方面,杜仲籽油和杜仲仁油中的维生素E分别是2028.91mg/kg和2190.80 mg/kg,其中含量最多的都是γ-TP,占维生素E总量的66.90%和73.60%;其次是δ-TP和(β、γ)-TT。杜仲籽油中的叶绿素含量要高于杜仲仁油,分别是7.53 mg/kg和5.15 mg/kg,杜仲籽油中的类胡萝卜素的含量是6.10mg/kg,而杜仲仁油中没有检测到类胡萝卜素。杜仲籽油和杜仲仁油中的桃叶珊瑚苷的含量差别不大,分别是15.98 mg/kg和14.85 mg/kg,。杜仲籽油和杜仲仁油的抗氧化能力较差,这与杜仲油和杜仲仁的脂肪酸组成有关(不饱和脂肪酸含量大于90%)。杜仲籽油的氧化诱导时间长于杜仲仁油的,说明杜仲籽油的氧化稳定性较好。为优选整籽制备杜仲籽油的最佳溶剂,探究了杜仲胶在非极性溶剂(正己烷、石油醚)和极性溶剂(丙酮、正丁醇)中的溶解规律。结果表明:当温度较低时,杜仲胶在极性与非极性溶剂中的溶解能力都很弱,当温度升高时,在非极性溶剂中的溶解能力会显著增强,并趋于稳定,而在极性溶剂中的溶解能力变化较小。杜仲胶在极性溶剂中的溶解能力要远低于在非极性溶剂中的溶解能力。以出油率和出胶率为考察指标,综合考虑所提油样的感官评价以及油样分离时的难易程度,考察的2种单一溶剂和4种混合溶剂对杜仲籽油提取率和品质的影响,在所考察的6种不同提取溶剂中,添加丙酮或正丁醇的正己烷混合溶剂比单一的正己烷具有更高的提取效率。在理化指标上,混合溶剂得到的油脂具有较低的过氧化值、碘值、不皂化物和折光指数,以及较高的皂化值和较深的色泽。不同溶剂所得油脂的脂肪酸构成在数值上变化并不明显,但混合溶剂具有较低的UFA/SFA。对6种不同溶剂所得油样中的维生素E检测,发现添加正丁醇的混合溶剂比其它溶剂具有更多的生育酚(TP)含量,尤其是δ-TP含量。此外,用Rancimat氧化稳定性测定仪测得混合溶剂得到的油脂具有更强的氧化稳定性。对提取条件中的温度、料液比和提取时间进行单因素分析,结果表明,分别在温度为35℃,提取时间为4 h,料液比为1:12(w:v)的单因素条件下,可获得相对较高的出油率和较低的出胶率。由于含有极性溶剂的混合溶剂所制备的杜仲籽油具有更强的氧化稳定性,这表明,极性溶剂的加入很可能增加了油脂中的抗氧化物质。为探究杜仲籽内源性抗氧化物质,分别用丙酮、乙醇、正丁醇等极性溶剂和正己烷、石油醚等非极性溶剂作为提取剂,对杜仲籽壳进行萃取浓缩,比较各提取浓缩液的对自由基清除能力,结果表明:正丁醇提取浓缩液对自由基的清除比例最高(58.77%),其次是乙醇和丙酮提取浓缩液,自由基清除比例分别为58.37%和55.21%。非极性溶剂(正己烷、石油醚)提取浓缩液的自由基清除比例较低,分别为15.62%和11.83%。氧化稳定性试验结果表明:添加杜仲籽壳的提取浓缩液后的氧化诱导时间都有显著增加(P<0.05),添加极性溶剂(正丁醇、乙醇、丙酮)的提取浓缩液的氧化诱导时间要大于添加非极性溶剂(正己烷、石油醚)的提取液的氧化诱导时间。对提取浓缩液中叶绿素、β-类胡萝卜素、甾醇、总酚、绿原酸和维生素E等微量成分含量进行测定,结果表明:用乙醇提取的浓缩液中叶绿素的含量最大(4.82 mg/100g),其次依次是丙酮、正丁醇、正己烷和石油醚;用正丁醇提取的浓缩液中胡萝卜素的含量最高(0.14 mg/100g);其次依次是丙酮、正己烷、乙醇和石油醚;用丙酮或乙醇提取的浓缩液中的甾醇的含量相近,其次依次是石油醚、正丁醇和正己烷;乙醇、正丁醇和丙酮提取的浓缩液中的总酚的含量明显高于正己烷和石油醚所提取的浓缩液中的。丙酮和乙醇提取的浓缩液中的绿原酸的含量含量为分别为71.62 mg/100g和65.81 mg/100g;其次依次为正丁醇、正己烷和石油醚。乙醇、正丁醇、石油醚、正己烷和丙酮五种溶剂提取的浓缩液中的维生素E的含量依次降低,其中乙醇提取的浓缩液中含量最高为29.48 mg/100g。对上述各微量成分含量与自由基清除比例进行相关性分析,结果表明:类胡萝卜素、甾醇、总酚、绿原酸和维生素E等的含量与对自由基的清除能力呈正相关,相关系数最高的为总酚(R2=0.9781);叶绿素的含量与对自由基的清除能力呈负相关。
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