睾丸酮降解菌的筛选鉴定及降解条件优化

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:neoo
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
当前,随着人口数量的增加、城市化进程的加快和激素类药物的大量使用,越来越多的激素类化合物被排放到环境中,对生态环境和人类健康造成了极大的破坏和影响。激素类化合物,又称为环境内分泌干扰物质,是具有高稳定性、难降解的一类持久性有机化合物,其低剂量就可以引起严重生理效应,因此其所引起的环境污染问题备受关注而成为研究的热点,其中环境雄激素是主要的内分泌干扰物之一,对生物的健康和生态安全构成严重的威胁。  本研究采用富集培养的方法,从福建某池塘底部的污泥中分离筛选和纯化到一株高效睾丸酮降解菌,对睾丸酮降解菌在液体培养基的降解特性进行了研究,以及进行16SrDNA的鉴定和系统发育学分析,并且对该菌株的降解条件进行了响应曲面的优化研究。主要研究结果和结论归纳如下:  1、对从池塘的污泥中分离的菌源C53进行纯化,获得四株睾丸酮降解菌C53-20、C53-25、C53-38、C53-42。在睾丸酮浓度为1mM的液体无机盐培养基中37℃、180 r/min培养12小时,细菌C53-20、C53-25、C53-38、C53-42对睾丸酮的降解率分别为:45%、26%、29%和32%。  2、通过对菌株C53-20进行16SrDNA的PCR扩增,得到一条长度为1.5 kb的片段,测序的结果与Genbank数据库进行序列同源性比对,并进行系统发育学的分析,确定其菌株为克雷伯氏菌属。  3、在12小时内对培养中的菌株C53-20每隔1小时取一次样,分别用紫外可见分光光度法(UV-Vis)和高效液相色谱(HPLC)测定菌液中的生物量和其睾丸酮含量。用SPSS统计软件对所测得的两组数据进行相关性分析。根据相关性分析结果,在0.99置信度(P<0.01)下两者的相关系数为0.893,可知菌株生长量与降解睾丸酮之间呈显著线性相关。  4、应用响应面法来优化能够促进C53-20菌株生物量大量生长的主要培养条件,以此来寻找菌株C53-20降解睾丸酮的最佳培养条件。通过单因素实验对菌株C53-20的降解条件进行了优化,结果表明:睾丸酮的最佳浓度为0.5mM,pH的最佳值为6.5,温度的最佳值为37℃。再通过最陡爬坡实验分析以确定各个因素的步长和方向。最后采用Box-Behnken实验,通过SAS的RSREG(响应面回归)过程对数据进行分析及二次回归拟合,并基于所得模型绘制3D响应曲面及2D等高线图,所得结果表明三个因素之间的相互作用显著影响菌的生长量。同时,得出C53-20菌株在降解睾丸酮的过程中最佳的温度为38.9℃,睾丸酮最佳的浓度为2.28mM,最佳的pH生长环境为8.4,此时在理论上菌液培养12小时的OD600值为0.512。模型的验证实验表明实际所得的值(OD600=0.483)与该理论值较为接近。
其他文献
学位
第六节调查研究应坚持的原则首先应肯定一点,调查研究需要坚持的原则,也是一切采访活动都应坚持的原则。只不过是运用调查研究这种采访手段,比一般的动态采访要挖掘得深,有
学位
该研究包括五个方面的内容.烟草花药绒毡层特异启动子TA29、解淀粉芽孢杆菌bar-nase和barstar基因的克隆、抗除草剂PPT的bar基因的亚克隆与全序列分析;barnase基因的 修饰;雄
该实验通过温度、光照对截形叶螨实验种群生长发育、繁殖、滞育等影响的研究,得出如下结果:在15-35℃恒温条件下,玉米截形叶螨的发育历期与温度呈负相关;雌、雄螨一代发良起
玉米在国民经济中占有重要地位,随着人民生活水平的不断提高对玉米的需求也日益增高。我国盐渍化土地面积有日趋增加的趋势为了培育出耐盐性增强的玉米新品种,以充分利用我国的盐碱化土地,本课题围绕三个方面开展了研究,研究内容及结果如下:(1)采用超声波辅助花粉介导植物转基因方法,将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因导入玉米自交系郑58,收获T0代种子246粒,T1代植株经卡那霉素抗性筛选及PCR检测获得37株阳
New non-volatile memory (e.g., phase-change memory) provides fast access, large capacity, byte-addressability, and non-volatility features. These features, fast
One of the key challenges for question answering is to bridge the lexical gap between questions and answers because there may not be any matching word between t
In wideband multi-pair two-way relay networks, the performance of beamforming at a relay station (RS) is intimately related to the accuracy of the channel state