Neuritin蛋白在大鼠脑损伤后时相性表达的研究

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创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury TBI)是指头部突然受到外力的撞击,导致的颅骨、脑膜、脑血管、脑组织、脑神经的结构改变、破坏,而造成的损伤。TBI在所有的创伤类型中,其死亡率和致残率是最高,预后差。各类神经营养因子为TBI的预后营造了良好的基础环境,在防止TBI后神经细胞的退变和凋亡等方面均发挥着重要的作用。Neuritin作为一种新的神经可塑性相关的神经营养因子,在颅脑损伤后的表达情况及表达规律,目前尚不清楚。目的:通过建立大鼠创伤性脑损伤模型,检测神经突出蛋白(neuritin)在大鼠TBI后不同时间点脑组织中表达情况及规律,探讨neuritin蛋白在大鼠脑损伤后修复过程中的意义,为进一步研究neuritin蛋白在脑损伤后神经营养作用奠定一定的基础。方法:42只SD大鼠随机分为正常组(n=6)和手术组(n=36)。手术组分为对照组和实验组,对照组为左侧大脑半球,实验组为右侧大脑半球,术后分为6小时、12小时、24小时、3天、7天、14天6个亚组,每组6只。通过改良Feeney法建立大鼠脑损伤模型,使用八臂迷宫对模型进行神经行为学评分。HE染色观察不同时间点脑挫裂伤组织及神经细胞形态变化。应用免疫组化检测不同时间点脑挫裂伤组织中neuritin蛋白的表达情况,Western-blot检测脑损伤后脑挫裂伤组织中neuritin蛋白的表达量变化。结果:八臂迷宫评分结果显示:建模后大鼠的工作记忆错误次数、参考记忆错误次数和测试时间较术前增加,具有统计学意义(p<0.05)。HE染色发现:实验组6小时神经元细胞开始出现水肿,24小时水肿达到高峰,3天出现大量坏死,7天胶质细胞大量增生,14天恢复正常,对照组各时间点与正常组无明显变化。免疫组化检测显示:实验组6小时观察到神经细胞胞膜、胞浆阳性表达增高,12小时-7天呈强阳性表达,14天表达明显降低,呈弱阳性;对照组、正常组均呈弱阳性表达。Western-blot检测neuritin蛋白含量显示:实验组6小时开始增高,24小时达到高峰,3天稍降低持续到7天,与对照组、正常组均有统计学差异(p<0.01),14天明显降低较正常组仍有统计学差异(p<0.05)。结论:创伤性颅脑损伤后,neuritin蛋白在脑损伤组织中表达明显增高,并有一定的时相性,提示neuritin蛋白可能在脑损伤后修复过程中起着重要作用。
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