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目的心肌纤维化(Cardiac fibrosis,CF)是心肌梗死(Myocardial infarction,MI)后心肌重构的发生过程,与心力衰竭密切相关。已表明双调蛋白(Amphiregulin,AR)与其他脏器纤维化发生相关。但目前AR与MI后CF之间的关系仍不明确。因此,本研究主要探讨AR与MI后CF之间的关系及具体分子机制。方法和结果1、MI后心脏巨噬细胞分泌AR。1)建立小鼠MI模型,应用Elisa、WB、RT-PCR及IF技术发现第7天时梗死边缘区、血液及心脏巨噬细胞中AR表达明显增高;2)体外TGF-β1刺激巨噬细胞后,RT-PCR及WB技术表明TGF-β1激活巨噬细胞MAPK通路导致AR分泌。2、AR诱导巨噬细胞M2极化。1)体外AR刺激BMDMs后巨噬细胞M2极化并分泌TGF-β1,此外,WB技术表明EGFR通路被激活,用EGFR抑制剂处理后TGF-β1表达明显下调;2)收集AR刺激BMDMs后的细胞上清(CM)与成纤维细胞共培养,WB、RT-PCR、IF及Transwell小室技术发现CM导致成纤维细胞激活。3、AR通过激活MI后心脏EGFR信号通路导致CF的发生及心功能的降低。1)体外AR处理成纤维细胞后可激活成纤维细胞和EGFR信号通路,而EGFR抑制剂可明显改善成纤维细胞和下游通路的激活水平;2)体内实验分Sham组,MI组、MI-shNC及MI-shAR组,其中慢病毒是在建MI模型时注射进入梗死心肌周边。(1)GFP荧光表明慢病毒注射成功,同时WB及RT-PCR技术表明慢病毒可下调第7天边缘区AR的表达;(2)28天内MI-shAR组小鼠生存率较MI组高;(3)小动物超声结果表明MI-shAR组小鼠心功能明显好转,而心衰指标明显降低;(4)取28天各组小鼠心脏后,应用RT-PCR、WB、天狼猩红染色、马松三色染色以及IF技术表明MI-shAR组小鼠的梗死边缘区纤维化面积及ECMs分泌明显减少;(5)取7天各组小鼠的心脏,应用TUNEL染色表明三组MI小鼠心肌细胞凋亡无明显差异,同时WB技术表明AR诱导CF通过EGFR信号通路。结论本研究表明,MI后心脏巨噬细胞分泌大量AR,其后AR刺激巨噬细胞分泌TGF-β1促进CF,另一方面激活成纤维细胞EGFR信号通路参与CF。本研究揭示了AR与MI后CF之间的关系并探讨具体机制,为MI后抗CF治疗提供新靶点。