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后发性白内障是现代白内障囊外摘出手术后影响视力最常见的并发症，术后2年发生率达10％～50％，其发病机制迄今尚未被完全阐明。组织病理和实验研究证实手术后残留的晶体上皮细胞增殖和迁移、生成新的晶体物质、胶原蛋白沉积和纤维化生引起晶状体后囊膜皱缩可能是形成后发性白内障的主要原因。层粘连蛋白、胶原、纤维连接蛋白及透明质酸等细胞外基质(extracellur matrix，ECM)作为细胞框架成分，构成晶体上皮细胞增殖、移行、黏附和囊膜收缩的基础，是白内障囊外摘除术后后囊膜混浊的前提条件。同时作为降解ECM重要成分的酶-基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMPs)及其组织抑制因子(tissue inhibitor matrix metalloproteinase，TIMPs)在这一过程中起着非常重要的作用。基质金属蛋白酶(MMPs)是一类锌离子依赖的蛋白水解酶，参与细胞外基质的降解，其通过对ECM成分的水解来影响其降解与沉积的动态平衡而参与多种细胞的生理和病理过程。MMPs在转录水平的表达受到生长因子、细胞因子及激素等因素的严格调控，在蛋白质水平其活性也受到其激活剂和抑制剂的调节。TIMPs是一组多功能因子家族，能特异性地抑制MMPs活性。生理条件下产生的TIMPs对正常ECM的改建和维持组织器官功能具有作用。病理条件下作为MMPs的抑制因子则启动和加重ECM沉积及纤维化，同时不依赖其抑制MMPs活性对细胞的增殖和分化中发挥重要作用。因此，MMPs和TIMPs二者的调节平衡在创伤修复、组织重建、血管和纤维化等疾病中起着重要的作用。浙江大学 删3W士学位论文 白内障囊外摘出术后房水中存在多种生长因子和细胞因子（如 EGF、 bFGF、TGF－p、TNF－a、IL－l、等），它们能调节晶体上皮细胞增殖利 ECM合成，诱导或调控 MMPS和 TIMPS的表达，从而构成细胞、细胞因 于、生R因于、ECM和 MMPS／TIMPS间复杂的网络调控机制，以维持细 胞和三CM的动态平衡，如果这种调控机制紊乱，就可能出现相应的病理 状态。 日前，有关MMPS及TIMPS对后发性白内障的影响尚米见文献报道。 本研究通过兔眼晶状体囊外摘除（extracapsular cataract extraction， ECCE）及人：－11晶体植入（intraocular lens implantation，IOL），米用分子 生物学技术研究术后房水中 M M P S活性和 TIM P S 的动态变化及其对后囊 膜混浊及纤维化的影响，探讨了ECCE＋＊L术后MMPS与T！MPS转录水 平的表达和蛋白质水平的组织来源，以及与转化生长冈于－p。（TGF－日。） 表达的相关性。 第一部分 兔眼人工晶体植人术后房水中基质金属蛋白酶及其 抑制因子与羟脯氨酸的动态变化 目的：探讨白内障囊外摘除及人工晶体植入术后房水中基质金属蛋白酶 及其抑制因于的动态变化。 方法：25只健康成年家兔，均一只眼行晶体囊外摘除及人＊：品体枪入术， 另一只未手术眼作为对照组。每5兔为一组，分别丁术后1、3、7、 14、30d 抽取房水，用酶谱分析法和反向酶谱分析法检测各标本中 的MMPS的活性及TIMPS量的变化；采用羟脯氨酸试剂盒测定术后 各组房水中羟脯氨酸量的变化。 结果：止常对照组兔眼房水中内有MMP－2、－7 的表达，而MMP－l、－9 的表达甚微；术后第 id，房水中 M M P－l、－2、－7、－9、TIM P－l 和 TIMP－二的活性出现明显升高，这种高水平可持续到术后第14d，并 2浙江大学2003 协士学位论文 有显著性差异（P＜O．05），但在术后3口d其活性仍高于正常对照组 （P＜0．05）；术后房水中羟脯氨酸的含量明显升高，且术后30天其量为 最高。 结论：MMPs 可能是户内障术后眼内炎症的重要炎症介质之一； MMPS／TIMPS平衡的破坏可能影响了白内障囊外摘除及人工晶体植 入术后细胞外基质的降解，表明 TIM P S可能是后囊膜混浊的形成和 纤维化的重要原因之一。 第二部分 兔眼人工晶体植入术后基质金属蛋白酶及其抑制因子 在虹膜、晶体上皮细胞的表达 目的：探讨白内障囊外摘除及人工品体植入术后基质金属蛋白酶及其抑 制冈于的组织来源。 方法：25只健康成年家兔，均一只眼行晶体囊外摘除及人 卜晶体植入术， 另一只术手术眼作为对照组。每5兔为一组，分别于术后1、3、7、 14、30d 取出虹膜和晶状体囊膜：用酶谱和反向酶谱分析法测定术 后各组虹膜组织中的MMPs及其TIMPs蛋白质的表达，用RT－PCR 检测各标本中的 TIMPs mRNA的表达。 结果：在止常虹膜、晶体上皮细胞组织均有TIMP－l、－2、－3和．4mRNA 的表达，而无相对蛋白质活性的表达；术后第 id，TIMP－l、．2、－3 和．4mRNA的表达明显升高，其中术后第7大，TIMP－l 和－ZmRNA 的表达量为最人，此后逐渐下?