痴呆是严重危害老年人健康的常见疾病。随着人口老龄化的进一步发展，由痴呆造成的社会和经济负担会日益沉重。加快对痴呆病理生理机制的研究和药物开发刻不容缓。AD作为痴呆最主要的类型，目前取得的最大进展是对淀粉样蛋白级联反应在AD病理机制中作用的认识，而这来源于AD的3种致病性基因突变的发现。实际上，基因突变导致的AD仅占AD患者的一小部分，目前绝大部分的研究集中在AD的易感基因领域，由此而推及到其他类型的认知损害性疾病，如MCI和VD等。目前ApoEε4是唯一得到一致认同的AD风险基因，但是ε2与AD以及ApoE基因多态性与MCI和VD的相关性有待进一步证实，需要不同地区、不同种族的大样本分子流行病学研究。本研究在中国南方汉族人群中对ApoE基因多态性以及一种新的AD候选基因，即cav-1基因上游PPC的长度多态性与AD、MCI和VD的相关性进行了研究。第一部分ApoE基因多态性与AD的相关性研究目的：观察ApoE的ε2、ε4等位基因和携带ε2、ε4的基因型与AD及其不同亚型的相关性，并探讨其对AD发病年龄的影响以及在不同年龄段对于AD患病风险的影响。方法：采用酚-氯仿法提取260例AD患者和286例正常对照者的外周血DNA，以扩增抗拒突变系统法检测ApoE基因多态性，在AD和NC组间进行病例对照研究，通过Logistic回归分析平衡混杂因素，观察ApoE基因多态性和AD的关系。结果：在AD、LOAD和EOAD组，ε2等位基因和ε2(+)基因型的分布频率均显著低于相应的对照组(P＜0．05)；而ε4等位基因和ε4(+)基因型的频率则显著高于对照组(P＜0．05)。在AD组，以ε3ε3基因型为参照，经Logistic回归分析平衡其他混杂因素，结果显示ε3ε4(P=0．000，OR=3．104，95％CI=2．031～4．745)和ε4ε4(P=0．000，OR=24．120，95％CI=5．567～104．512)显著增加AD的患病风险。ε4(+)基因型与AD患病呈显著正相关(P=0．000，OR=3．630，95％CI=2．425～5．424)，而携带ε2能显著降低AD的患病风险(P=0．046，OR=0．502，95％CI=0．255～0．988)。分层分析发现，ε2(+)基因型的作用仅见于女性和家族史(-)者；而ε4(+)基因型的作用可见于各个亚组。携带ε2或ε4对AD的发病年龄均无显著性影响(P＞0．05)。随着ε2拷贝数的增加，AD的患病率逐渐下降，但发病年龄无显著变化(P＞0．05)；而ε4拷贝数的增加则显著提高了AD的患病率，但对发病年龄也没有显著影响(P＞0．05)。在LOAD组，ε2ε3基因型可以降低LOAD的患病风险(P=0．043，OR=0．358，95％CI=0．133～0．966)，而ε3ε4(P=0．000，OR=3．727，95％CI=2．101～6．610)和ε4ε4(P=0．000，OR=39．587，95％CI=5．039～311．017)增加LOAD的风险。ε2(+)基因型携带者LOAD的患病风险是ε3ε3携带者的36．4％(P=0．033，OR=0．364，95％CI=0．144～0．920)，而携带ε4患LOAD的风险是ε3ε3携带者的4．565倍(P=0．000，OR=4．565，95％CI=2．651～7．861)。分层分析发现，ε2(+)基因型的作用仅见于女性，但在家族史(-)者也存在降低LOAD风险的趋势(P=0．051)；ε4(+)基因型在各个亚组均增加LOAD的易感性。携带ε2的LOAD患者的发病年龄在女性亚组高于非携带者，而ε4携带者的发病年龄在女性和家族史(-)亚组明显低于非携带者。ε2拷贝数的增加使LOAD的患病率逐渐下降，发病年龄显著提高。而ε4拷贝数的增加则显著增加了LOAD的患病率，且明显降低了LOAD的发病年龄。在EOAD组，ε3ε4(P=0．004，OR=2．613，95％CI=1．362～5．012)和ε4ε4(P=0．010，OR=15．866，95％CI=1．911～131．735)显著增加EOAD的易感性。ε2(+)基因型与EOAD的患病风险无显著相关性(P=0．458)，而ε4携带者患EOAD的风险是ε3ε3携带者的2．912倍(P=0．001，OR=2．912，95％CI=1．565～5．420)。分层分析发现，ε4(+)基因型的作用主要见于女性和家族史(-)者。携带ε2或ε4对EOAD的发病年龄均无显著性影响(P＞0．05)。ε4拷贝数的增加则显著提高了EOAD的患病率，但对EOAD的发病年龄没有显著影响(P＞0．05)。按年龄进行细化分层发现，ApoEε2和ε4均在66-70岁年龄段对AD的患病风险施加最显著的影响。结论：ApoEε4是AD(包括LOAD和EOAD)的危险因素，能以剂量依赖的方式增加患病风险，并能以剂量依赖的方式降低LOAD的发病年龄。ApoEε2是LOAD而非EOAD的保护性因素，可以提高LOAD的发病年龄。ApoEε2和ε4对AD的影响是年龄依赖性的，并受性别因素的影响。第二部分cav-1基因上游PPC长度多态性与AD的相关性研究目的：观察cav-1基因上游PPC长度多态性在汉族AD患者和正常对照者中的分布情况，以及和AD及其亚型的相关性。方法：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测257例AD患者和279例正常对照者cav-1基因上游PPC长度多态性，通过Logistic回归分析观察其与AD的相关性。结果：在AD和NC组中共检测到12种不同长度的等位片断，呈近似正态分布。S、L等位片断和携带S、L片段的基因型以及等长基因型均不影响AD的患病风险，也不影响AD的发病年龄。以M／M基因型为参照，经Logistic回归分析发现，M／L基因型可以显著增加LOAD的患病风险(P=0．043，OR=2．196，95％CI=1．025～4．702)。分层分析发现，携带L等位片断使男性患LOAD的风险增加(P=0．007，OR=6．481，95％CI=1．685～24．935)，并可以降低非ε4携带者患LOAD的发病年龄(P=0．035)。在EOAD组，携带S等位片断使女性的患病风险增加(P=0．013，OR=5．342，95％CI=1．426～20．004)，而等长基因型则增加了男性患EOAD的风险(P=0．038，OR=4．400，95％CI=1．082～1 7．884)。对LOAD和EOAD组进行比较发现，L(+)基因型在男性LOAD组的分布频率明显高于EOAD组(x~2=3．979，P=0．046)；而S(+)基因型(x~2=5．358，P=0．021)在女性EOAD组的分布频率显著高于LOAD组。按年龄进行细化分层发现，PPC基因型对AD的影响具有年龄依赖性。结论：cav-1基因上游PPC-L等位片断是男性患LOAD的危险因素，而S等位片断是女性患EOAD的危险因素。等长基因型增加男性患EOAD的风险。L(+)基因型可以降低非ε4携带者患LOAD的发病年龄。PPC基因型对AD的影响具有年龄依赖性。LOAD和EOAD在遗传性易感因素方面可能存在差异。第三部分ApoE基因多态性和cav-1基因上游PPC长度多态性与MCI的相关性研究目的：观察cav-1基因上游PPC长度多态性在MCI患者中的分布，以及ApoE基因多态性和PPC长度多态性与MCI的相关性。方法：分别应用扩增抗拒突变系统法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测96例MCI患者和286例正常对照者的ApoE基因多态性和PPC长度多态性，采用病例对照和Logistic回归分析方法观察其与MCI的相关性。结果：ε2在MCI和NC组间无明显差异(P=0．306)，而ε4在MCI组的分布显著高于NC组(x~2=22．572，P=0．000)。经Logistic回归分析发现，ε3ε4(P=0．041，OR=1．865，95％CI=1．025～3．393)和ε4ε4(P=0．007，OR=10．388，95％CI=1．870～57．705)显著增加MCI的患病风险。ε4(+)基因型与MCI的患病风险呈显著正相关(P=0．05，OR=2．241，95％CI=1．283～3．914)，而携带ε2不影响MCI的患病风险(P=0．614)。分层分析显示，ε4的作用主要体现在女性和家族史(-)者。ApoE基因多态性不影响MCI的发病年龄。与AD组比较发现，ε2(+)基因型在MCI组的分布频率显著增高(x~2=6．040，P=0．014)；而ε4(+)基因型在两组间无显著性差异(P=0．116)。在非ε4携带者中，MCI组L等位基因和L(+)基因型的分布频率高于NC组，经Logistic回归分析证明，携带L等位片段增加非ε4携带者患MCI的风险(P=0．032，OR=2．410，95％CI=1．080～5．379)。PPC长度多态性不影响MCI的发病年龄，在AD和MCI组间无差异。结论：ApoEε4是MCI的危险因素，但不影响MCI的发病年龄。ε4的作用受性别影响，在女性作用显著。ε2在MCI组的分布频率显著低于AD组。cav-1基因上游PPC-L等位片断是非ε4携带者患MCI的危险因素。第四部分ApoE基因多态性和cav-1基因上游PPC长度多态性与VD的相关性研究目的：观察cav-1基因上游PPC长度多态性在VD患者中的分布，以及ApoE基因多态性和PPC长度多态性与VD的相关性。方法：分别应用扩增抗拒突变系统法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测54例VD患者和60例正常对照者的ApoE基因多态性和PPC长度多态性，采用病例对照和Logistic回归分析方法观察其与VD的相关性。结果：ε2、ε4等位基因和携带ε2、ε4的基因型在VD和NC组间均无显著性差异(P＞0．05)，而与AD组相比，ε4(+)基因型在AD组的分布频率显著高于VD组(x~2=8．884，P=0．003)。PPC长度多态性在VD与NC、VD与AD组间均没有显著性差异(P＞0．05)。结论：ApoE基因多态性和PPC长度多态性均不影响VD的患病风险。