论文部分内容阅读
第一部分微波消融联合HSP90抑制剂(PF-04929113)、TGF-β1抑制剂(SB-525334)治疗骨肉瘤的体外实验研究目的探索微波消融联合PF-04929113、SB-525334在较低消融温度下肿瘤杀伤力最强的组合。方法将兔鳞癌细胞(VX2)按照温度区间分为:37℃组、41℃组、48℃组、60℃组。每个温度组又设定对照组(Control组)、PF-04929113组(p组)、SB-525334组(s组)、PF-04929113和SB-525334联合组(p+s组)。MTT法测定各组VX2生存率。钙黄绿素、流式细胞仪检测检测VX2死亡/凋亡情况。细胞免疫荧光检测目标蛋白的变化。结果MTT显示48℃组VX2细胞生存率分别为:Control组86.08%、p组64.81%、s组63.18%、p+s组37.18%,其它温度组各组内生存率无显著差异。且48℃p+s组达到与60℃ M组细胞凋亡率相近(13.01%),且凋亡/坏死率显著高于仅微波或抑制剂处理组。钙黄绿素检测和流式检测均与MTT显示一致结果。48℃p+s组免疫荧光结果显示热休克蛋白90(HSP90)、转化生长因子β l(TGF-βl)、Smad4表达未见明显增强,而细胞色素C(Cyto-C)、凋亡蛋白酶3(caspase 3)、caspase 9表达增强。结论微波消融联合PF-04929113、SB-525334在48℃时肿瘤杀伤效果好,其对于肿瘤杀伤率接近微波消融至60℃时杀伤率。第二部分低温微波消融联合PF-04929113、SB-525334治疗骨肉瘤的初步体内验证及机制研究目的进一步在体内验证低温微波消融联合PF-04929113、SB-525334治疗骨肉瘤的效果,并揭示其分子机制。方法用新西兰大白兔建立骨肉瘤模型,分为对照组Control组、M组、M+p组、M+s组、M+p+s组,待肿瘤大小为约3 ×3cm时微波处理各组,隔天记录肿瘤大小和体重,于21d时取肿瘤做HE染色和免疫组化。结果微波消融术后21天Control组体积最大,M+p+s组肿瘤体积大小与其它各组均有统计学差异。术后21天内各时间点各组体重均无统计学差异。免疫组化显示M+p+s组中TGF-β1、Smad4、HSP90表达降低;Cyto-C、casepase3、casepase9表达升高。M+p+s组肿瘤明显小于其它组,HE染色显示原肿瘤区肿瘤组织比例明显少于其它组。结论微波消融联合PF-04929113、SB-525334在48℃时肿瘤杀伤效果好,能有效抑制骨肉瘤生长。