目的：制备出高效价、高亲和力Cu²⁺的单克隆抗体,并对抗体的各项指标进行鉴定,初步建立起Cu²⁺的间接竞争ELISA和胶体金免疫层析试纸条的方法,从而为以后建立重金属铜离子的免疫学快速检测体系奠定基础。方法：因Cu²⁺是小分子物质,其本身不具有免疫原性,我们利用双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA将Cu²⁺螯合后分别与载体蛋白牛血清白蛋白（BSA）和鸡卵清白蛋白（OVA）偶联,制备出完全抗原（免疫抗原和检测抗原）。并以Cu-DTPA-BSA作为免疫原免疫BALB/c小鼠,以Cu-DTPA-OVA作为检测抗原。应用杂交瘤技术制备抗Cu²⁺的单克隆抗体。并对单克隆抗体的效价、亚类、亲和力、特异性等方面进行鉴定,进而初步建立了检测重金属铜的间接竞争ELISA和胶体金免疫层析检测方法。结果：通过筛选成功获得三株稳定分泌Cu²⁺的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中在抗Cu²⁺的三个细胞株中4C2F10细胞株分泌的抗体的评价较好,其分泌的抗体属于IgG1,相对亲和力系数为3.37±0.31×109M-1,该单抗与载体蛋白OVA无交叉反应,与Co²⁺、Zn²⁺分别存在17.5%,8.75%的交叉反应,与其他重金属离子的交叉反应均小于2%,初步建立了检测重金属铜的间接竞争ELISA方法的最低检测限（LOD）为2ng/mL, IC50为12.5 ng/mL;胶体金试纸条的最低检测线（LOD）为80ng/mL,显色时间在3min左右。结论：成功制备了重金属铜的免疫抗原和检测抗原,获得三株稳定分泌抗Cu²⁺单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌的单克隆抗体亲和力高,特异性较好。利用制备的抗Cu²⁺的单克隆抗体初步建立的间接竞争ELISA检测方法和胶体金免疫层析检测方法,均达到国家Ⅲ类水质检测标准（GB/T 14848-93:1000ppb）。为今后推广应用打下基础。