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目的:检测三种方法提取的白芷有效成分对酪氨酸酶活性、抗多巴自动氧化反应等黑色素生成因素和黑色素代谢因素的影响,优选白芷提取方法。
方法:
(1) 采用水提醇沉法、醇提法、超临界CO<,2>萃取三种方法提取白芷有效成分。
(2) 使用紫外分光光度法,检测三种提取物质不同浓度对酪氨酸酶活性的影响、抗多巴自动氧化反应作用、抗紫外线催化作用以及促黑色素分解的能力。
(3) 使用30g±昆明小鼠,按照20ml/kg注射黄体酮,配合紫外线照射,共计30天;造模后涂抹不同白芷提取液,比较小鼠肝脏的SOD和MDA变化,采用HE染色和免疫组化HMB<,45>标记方法,观察小鼠皮肤黑色素的变化和代谢。
结果:
(1) 水提醇沉高浓度组对酪氨酸酶活性的抑制率达43.23%,高于阳性对照组,超临界CO<,2>萃取的白芷挥发油对酪氨酸酶活性有激活作用。
(2) 水提组白芷和超临界萃取组白芷抑制多巴自我氧化作用和抗紫外线作用均随浓度的降低而升高,对黑色素的分解作用随浓度的降低而降低。
(3) 水提组白芷对小鼠肝脏MDA的清除作用最强;各组中药对肝脏SOD均无明显作用;水提组小鼠皮肤HMB<,45>标记的黑色素阳性面积最少,与造模空白组比较P<0.05。
结论:白芷水提物对黑色素的生成的各主要环节均呈明显的抑制作用,并且降低小鼠体内的过氧化作用,促进黑色素在皮肤中的代谢,因此是白芷作为外用脱色剂的最佳提取方法。