目的提高16型人乳头瘤病毒(HPV16)L1基因以杆状病毒为载体,在昆虫细胞中的表达水平,为研制预防性HPV疫苗奠定基础。方法根据昆虫细胞密码子偏性对野生型HPV16L1基因进行改造,全基因合成密码子优化型HPV16L1基因,利用Bac-to-Bac表达系统获得重组杆状病毒,感染昆虫细胞Sf9和High Five。Western blot鉴定表达产物；电镜下观察病毒样颗粒形成。利用ELISA法评价HPV16L1基因的优化效果,并探讨L1蛋白在两种昆虫细胞中表达的最佳条件。结果Sf9和High Five细胞的表达产物经Western blot检测,在相对分子质量56 kD处均出现HPV16L1的特异性条带；电镜下可见病毒样颗粒在两种昆虫细胞的核内形成；ELISA法结果显示密码子优化型HPV16L1基因的表达水平显著高于野生型(P<0.01)。High Five细胞表达的最佳条件为MOI=10,表达时相72 h,其L1蛋白表达量至少比Sf9细胞高3倍。结论密码子优化技术确实能够促进HPV16L1蛋白的高效表达,而High Five细胞表现出的显著优势尤其值得关注。