血链球菌细菌素对白色念珠菌粘附力及杨氏模量的影响

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目的:⑴探讨白色念珠菌菌体和菌丝的粘附力、杨氏模量的大小;⑵探讨血链素对白色念珠菌形变量、粘附力及杨氏模量的影响。  方法:①血链球菌细菌素的提取:将血链球菌标准株ATCC10556进行复苏传代,应用低温高速离心、超声破碎等方法提取血链球菌细菌素(简称血链素)。②白色念珠菌的菌菌体及菌丝的选择性培养:将培养好的白色念珠菌菌体孢子进行出芽诱导,得到白色念珠菌菌丝相。③利用原子力显微镜(AFM)接触模式,采用相对测量法(基准值调整为3.5Mpa)分别测量白色念珠菌菌体菌丝的粘附力、杨氏模量;⒁血链素作用白色念珠菌的菌体菌丝:将浓度为1g/L的血链素200μL,浓度为5×106cfu/mL的白色念珠菌菌悬液500μL加入到1mL的RPMI-1640培养基中,涡轮震荡混匀,37℃恒温培养24h后取出涂片待检。⑤利用原子力显微镜接触模式,采用相对测量法(基准值调整为3.5Mpa)测量经血链素作用后的白色念珠菌的形变量、粘附力及杨氏模量。  结果:⑴白色念珠菌培养:白色念珠菌出芽生殖,革兰染色,镜检观察见白色念珠菌菌丝。⑵白色念珠菌菌体平均粘附力为7.35nN,杨氏模量平均值为7.33Mpa;菌丝的平均粘附力为9.82nN;杨氏模量平均值为4.04Mpa。⑶血链素作用后白色念珠菌后,原子力显微镜呈像显示白色念珠菌菌体扭曲变形,表面粗糙,并形成盘状凹陷。⑷血链素作用白色念珠菌后,粘附力值随着作用区域形变量的增大而逐渐减小,杨氏模量值随着形变量的增大也不断减小,与对照组相比具有显著差异。  结论:①血链素使白色念珠菌菌体的形变量增大。②白色念珠菌的菌丝的粘附力大于菌体的粘附力,白色念珠菌菌丝的杨氏模量小于菌体的杨氏模量。③血链素可明显降低白色念珠菌的粘附力,血链素也可使白色念珠菌的杨氏模量减小。
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