神经退行性疾病（neurodegenerative diseases）是一种危害人类健康的主要疾病，其病变机制的研究是近年神经科学的研究热点之一。深入研究神经退行性疾病的分子机制，探寻新的疾病早期诊断及治疗的分子生物学技术，不但有着重要的科学价值，而且具有重大的社会、经济意义。 有两种家族性的、神经退行性病变（FBD和FDD）的临床症状和病理特征都与最常见的阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease）相似，被认为是研究老年痴呆症的很好的实验和临床模型，其致病基因及相应的分子生物学机制最近得到阐明。BRI₂基因单碱基突变造成的通读和核苷酸重复，是基因水平上导致这两种痴呆症的主要原因。该基因属于BRI基因家族的一员，目前得到分离鉴定的该家族成员包括BRI₁，BRI₂和BRI₃。其中只有BRI₃是在神经系统特异表达的。 BRI₃（Brain Protein I3）作为BRI基因家族的一个成员，属于Ⅱ型单跨膜蛋白，只有一个跨膜区，N端较短，C端较长。生物信息学软件分析结果：N端在胞内，C端在胞外；没有任何明显的定位信号和功能结构域。Northern杂交结果显示，该基因主要在脑表达。为了进一步了解BRI₃基因在脑组织中的表达分布情况，我们克隆了hBRI₃的小鼠同源基因（mBRI₃），以3’非编码区的一段序列为模板设计并转录了原位杂交探针。用小、大鼠的中枢神经系统切片和小鼠整体胚胎进行原位杂交，研究小鼠的mBRI₃mRNA在中枢神经系统组织和细胞中的分布。实验结果显示，mBRI₃mRNA在大脑皮层、海马、蒲根野细胞层、桥脑面神经核、颞叶皮层以及脊髓前角神经元中高表达。 为进一步了解hBRI₃蛋白的亚细胞定位，我们构建了真核表达载体pEGFP-N1-BRI₃（绿色荧光蛋白融合表达质粒），转染SH-SY5Y细胞。利用共聚焦显微镜进行观察发现，荧光信号主要存在于细胞核周围并呈斑块状分布。这种荧光定位形式类似于Golgi体蛋白的细胞内分布。在此基础上，通过构建hBRI₃的N端和C端缺失突变体，进一步确定BRI₃基因的高尔基体定位序列。将荧光表达载体pEGFP-N1-BRI₃（△C）和pEGFP-N1-BRI₃（△N）分别转染SH-SY5Y细胞后发现，只有pEGFP-N1-BRI₃（△N）阳性细胞的荧光在细胞核周围呈斑点状分布，所以此结果提