半胱氨酸在人体内扮演关键作用,不仅是维持体内氧化还原平衡过程中的关键调节物质,同时参与蛋白质合成,转录后修饰,以及体内代谢重金属的解毒过程。半胱氨酸含量失常时可能会导致生长迟缓、帕金森症、阿兹海默症、心血管疾病等疾病,因此检测生物样品内的半胱氨酸浓度具有重要的应用价值。有机小分子荧光探针具有优秀的选择性、灵敏性等优点,目前已开发出多种用于检测半胱氨酸的荧光探针。其中,丙烯酸酯基团应用最为广泛,但是却存在水溶性差的缺点。本文基于文献调研,通过将香豆素分子内酯键打开设计了荧光探针C1、C2,通过在苯并噻唑分子中引入溴的取代设计了比率型荧光探针H1,并研究了荧光探针对半胱氨酸的检测能力。探针C1能够在30分钟内完成与半胱氨酸的反应,但是需要在10%的乙腈的磷酸盐缓冲液中溶解。探针C2将探针C1分子中疏水的乙酯替换成亲水的氰基,显著提高水溶性,能够在1%乙腈的磷酸缓冲盐溶液中对半胱氨酸进行选择性识别,且检测极限低至10 nM。比率型探针H1能够在15分钟完成与半胱氨酸的选择性反应,且比率型荧光强度与半胱氨酸浓度呈现高度的线性相关。其中探针C2具有良好的水溶性、灵敏性、选择性,探针H1具有高选择性与快速的反应速度。这两个探针的开发对检测生物样本中的半胱氨酸具有良好的应用潜力,为荧光探针的设计提供了新的思路。