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本文探讨了温肺化饮法治疗哮喘的作用机理，为今后研究哮喘的发病机理和治疗提供了理论和实验依据。对客观评价中药的抗气道炎症效应也有指导作用。
研究方法：实验选用健康雄性Wistar大鼠40只，鼠龄10周，体重260-300g，随机分为5组：正常对照组，模型组，桂龙咳喘宁组，平喘汤大剂量组，平喘汤小剂量组，每组8只。造模方法：除正常对照组外，在大鼠胸部皮下分3点注射0.1％卵白蛋白(OVA)生理盐水加氢氧化铝(粉剂)160mg混悬液(配制后4℃冰箱过夜，用时混匀)共1ml，同时腹腔内注射灭活百日咳杆菌疫苗1ml(6×109个/ml)致敏；第二周再重复致敏一次。正常对照组在胸部皮下分3点及腹腔注射生理盐水共2ml。除正常对照组外，第三周将大鼠放入自制的不完全封闭的有机玻璃箱(20cm×30cm×40cm)内，每次4只，接超声雾化器的呼出管，每日吸入1％OVA生理盐水20min，连续七天进行，每次激发前45-60分钟给予H1受体拮抗剂苯海拉明(10mg/Kg)皮下注射，以预防激发导致动物死亡。空白对照组以生理盐水代替卵蛋白进行雾化吸入。药物干预：第四周平喘汤大剂量组、平喘汤小剂量组和桂龙咳喘宁组分别按16g/kg体重、4g/kg体重、2.4g/kg体重在诱喘前三十分钟灌胃给药，每日1次，连续七天。正常对照组和模型组每次以生理盐水代替灌胃。标本采集及处理：第五周开始禁食不禁水，进行标本采集。以3％戊巴比妥那40mg/kg腹腔注射麻醉动物，待麻醉完全后再消毒并切开颈部皮肤，钝性分离肌肉，颈动脉插管取血。取血样标本6ml，在4℃条件下低温离心15min(4000r/min)，制备血清，低温保存并送检。取血样标本4ml，置于抗凝试管中(内含肝素300U)，4℃条件下低温离心12min(2000r/min)，制备血浆，-20℃保存并送检。放血处死动物，即刻暴露气管，以一次性输液针制备气管插管：剪去针头端，使断口呈60。左右，用10ml注射器将5ml肝素—生理盐水(5U/ml)注入支气管和肺，随即反复轻轻回抽约2～3次，收集灌洗液，重复进行2次灌洗，共10ml，回收率约80％，支气管肺泡灌洗液(BALF)置冰浴中待检。标本处理：BALF在4℃条件下低温离心10min(1200r/min)，取上清液，-20℃冰存作为待测样品；沉淀物用1ml肝素—生理盐水(5U/ml)重悬。白细胞总数用细胞计数板在低倍镜下计数。吸取0.1ml细胞重悬液滴于载玻片上均匀涂片，室温晾干，随即用Wright染色液染色7min，再用Giemsa染色液复染1min，清水冲洗晾干，置油镜下进行白细胞分类计数。每张玻片计数200个细胞，用于计白细胞总数、嗜酸性细胞(EOS)绝对计数和细胞分类，其中包括单核/巨嗜细胞(AM)、淋巴细胞(Lyn)、嗜酸性细胞(EOS)、嗜中性细胞(Neu)。开胸，取右肺组织放入10％甲醛中固定，石蜡包埋、切片、HE染色。在光镜下先低倍镜观察病理表现，后在高倍镜下分类计数炎症细胞，计数200个。并观察支气管及肺组织炎性细胞浸润情况，支气管粘膜、上皮细胞和肺泡损害情况，肺气肿程度及渗出物中细胞成分的变化，以及基底膜、平滑肌、杯状细胞增生情况等病理变化。采用ELISA法测定BALF中白细胞介素4(IL-4)、血浆血栓素B2(TXB2)、血清免疫球蛋白E(IgE)等指标变化情况。
全部计量数据均以均数±标准差(-X±S)表示，用成组配对t检验进行差异性比较。采用SPSS10.0软件对数据进行处理。
研究结果：平喘汤对肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及分类的影响：模型组与正常组比较，BALF中细胞总数显著高于正常组(p＜0.01)；BALF中EOS、Neu、Lyn的比例均比正常组明显增高(p＜0.05)，其中尤以EOS增高明显(p＜0.01)，说明模型组肺部确实存在慢性炎症，有大量炎性细胞浸润。模型组BALF中细胞总数、EOS绝对值计数及EOS分类较正常组、桂龙咳喘宁组和平喘汤大剂量组均有升高，比较有极显著差异(p＜0.01)，与平喘汤小剂量组比较无显著差异(p＞0.05)，桂龙咳喘宁组、平喘汤大剂量组BALF中细胞总数、EOS绝对值计数与正常组比较无显著差异(p＞0.01)，平喘汤小剂量组与模型组比较无差异。表明平喘汤能够抑制炎症细胞，尤其是EOS对气道的浸润，且中药的疗效与剂量有一定关系。
平喘汤对肺组织病理改变的影响：在光镜下观察，正常组可见正常肺组织和肺泡结构，支气管上皮完好，粘膜光滑，各层结构清晰；模型组光镜下可见小支气管炎症反应明显，支气管管壁破坏、纤毛倒伏、粘膜充血水肿，粘膜及粘膜下层平滑肌可见大量的以EOS为主的炎症细胞浸润，管腔内可见上皮细胞脱落及粘液栓形成，支气管基底膜、平滑肌增厚，肺泡间隔增宽；桂龙咳喘宁组和平喘汤大剂量组与模型组比较，支气管粘膜充血水肿及EOS浸润等上述病理变化明显减轻，肺泡结构存在，组织形态学上未见破坏，肺泡壁轻度增厚，肺内小血管扩张充血，炎症反应轻微。平喘汤小剂量组与模型组比较，无明显变化。
平喘汤对BALF中IL-4的影响：正常组BALF中IL-4含量很低，而模型组BALF中IL-4明显增加，桂龙咳喘宁组和平喘汤大剂量组与模型组比较其IL-4水平明显降低(p＜0.01)；平喘汤小剂量组与模型组比较IL-4水平也有一定程度降低(p＜0.05)
平喘汤对血浆TXB2、血清IgE的影响：模型组TXB2和IgE较正常组明显增高(p＜0.01)，平喘汤小剂量组和平喘汤大剂量组与模型组比较其TXB2和IgE水平明显降低(p＜0.01)；桂龙咳喘宁组与模型组比较TXB2和IgE水平也有显著差异(p＜0.05)
研究结论：实验结果表明，在成功造模的基础上，通过对实验性哮喘大鼠气道变应性炎症具有评价意义的多项指标测定和病理组织观察，以温肺化饮法为治则组方的平喘汤能够减少实验性哮喘大鼠BALF中EOS数，使IL-4水平明显降低，抑制炎症细胞和炎症介质释放，从而降低气道反应性；能够降低血浆TXB2，从而对抗支气管平滑肌收缩，抑制IgE介导的Ⅰ型变态反应发生，从而延缓哮喘发生和减轻哮喘发作的严重程度，恢复正常的免疫功能状态。这可能是温肺化饮法治疗哮喘、预防哮喘发作的重要免疫学机制。