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通过膳食植物多酚可以起到保健和治疗多种疾病的目的。茶叶中主要的儿茶素表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)具有多种功效,如抗氧化、抗炎症、抗肿瘤、降血脂等。然而,EGCG在中碱性环境中不稳定,易发生聚合和降解,其体内生物利用率较低,严重限制了其在各个领域的应用。众多研究表明采用纳米材料包封EGCG可以提高其在碱性环境下的稳定性,增强其在胃肠道的吸收。壳聚糖是一种天然可降解的高分子材料,具有良好的生物相容性,并且安全无毒,已经广泛应用于纳米材料的制备。在以前的研究中,我们通过自组装的方法制备了包封EGCG的壳聚糖(CS)-酪蛋白磷酸肽(CPP)纳米复合物。体外释放动力学表明该纳米复合物具有良好的缓释作用,并且Caco-2细胞模型实验表明CS-CPP纳米复合物可明显增强EGCG的肠渗透性和吸收,从而增强了其生物利用率。然而包封EGCG的纳米复合物的生物学性能还没有被研究。本研究通过SAXS技术探究壳聚糖和CPP之间的相互作用,制备CS-EGCG-CPP纳米复合物,考察其在碱性环境下对EGCG稳定性的保护作用,并系统评价其在体外的抗氧化和抗炎症作用。主要研究结果如下:1.CS-EGCG-CPP纳米复合物的制备、表征及其在碱性环境下的稳定性小角X射线散射(SAXS)是一种有效的表征多肽和多糖之间相互作用的方法。胃肠道的pH值变化(2.0-6.2)可引起壳聚糖和CPP之间的的相互作用,形成CS-CPP复合物。CS-CPP复合物内部的Df值的大于3,表明形成了致密颗粒,并且Df值一般随CS/CPP质量比的提高而增大。研究CS浓度、CS/CPP质量比和EGCG浓度三个因素对制备的CS-EGCG-CPP纳米复合物的粒径和包封率的影响。纳米复合物的粒径随CS和EGCG浓度的增大而增大,随CS/CPP增大而减小。包封率随CS/CPP增大和EGCG浓度的增加而降低,但随着CS浓度的增加,呈现出先增大后降低的趋势。透射电镜显示制备的包封EGCG的CS-CPP纳米复合物呈规则的球形,分散均匀,平均粒径208 nm,纳米复合物表面的zeta电位为+25.6 mV。CS-EGCG-CPP纳米复合物能够显著(p<0.01)增强EGCG在碱性环境下(pH 7.4)的稳定性。2.CS-EGCG-CPP纳米复合物抗氧化活性的研究化学抗氧化实验表明CS-EGCG-CPP纳米复合物具有与EGCG相似的总还原力、铁离子还原力(FRAP)、清除ABTS自由基和清除超氧阴离子自由基能力。并且显示出高于EGCG的金属离子螯合活性。在细胞水平,CS-EGCG-CPP纳米复合物表现出比EGCG更强的对H2O2诱导RAW264.7细胞氧化损伤的保护作用。3.CS-EGCG-CPP纳米复合物抗炎症活性的研究利用LPS诱导RAW264.7和Caco-2细胞建立体外炎症模型。在RAW264.7细胞模型中,CS-EGCG-CPP纳米复合物能显著抑制TNF-α、IL-6、IL-1β和NO的释放。在Caco-2细胞模型中,CS-EGCG-CPP纳米复合物能显著抑制TNF-α和IL-8的分泌。并且在两种模型中,CS-EGCG-CPP纳米复合物都表现出比含有相同EGCG浓度的游离EGCG更强的抑制炎症介质分泌的能力。通过蛋白免疫印迹测定发现CS-EGCG-CPP纳米复合物具有比游离EGCG更好的抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中iNOS表达的能力。在两种细胞模型中,CS-EGCG-CPP纳米复合物和游离的EGCG都能调控NF-κB信号通路,抑制IκB的降解和磷酸化以及p65的表达。相比游离的EGCG,CS-EGCG-CPP纳米复合物的抗炎症活性得到显著提高。